顎関節症患者滑液より回収された浮遊細胞における炎症性メディエイターの遺伝子解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671923
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 福田 雅幸 秋田大学, 医学部, 助手 (20272049)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 哲 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (60226850)
• Keywords: 顎関節内障 / 免疫組織化学 / iNOS / COX-2 / NFkappa-B / 滑液浮遊細胞 / PCR

Research Abstract

顎関節内障患者の関節内での病態を解明するため、手術で得られた滑膜における炎症性メディエイターの発現について免疫組織化学的に解析を行った。われわれは、顎関節症患者滑液中に一酸化窒素(NO)が存在する事を報告してきたが、その由来を調べるため、患者滑膜での誘導型NO合成酵素(iNOS)の発現を免疫組織学的に検討し報告した(Hidetaka H,Tetsu T,et al.Arch Oral Biol 2001)。患者群では滑膜表層細胞、血管内皮細胞にiNOSが強陽性であったが、骨折患者滑膜での発現はほとんど認めなかった。また、表層細胞ではCD68陽性細胞の分布に一致していた。炎症に深く関与し、NOによって誘導されるCyclooxygenase-2(COX-2)の発現についても同様に検討した。構成型酵素であるCOX-1は顎関節内障患者滑膜、骨折患者滑膜ともに発現していたが、COX-2は顎関節症患者滑膜の表層細胞、血管内皮細胞で疾患特異的に発現している事を確認し発表した(第45回日本口腔外科学会2000)。現在はiNOSの発現に関与する転写因子であるNFkappa-Bが核内移行していることを免疫組織化学的にすでに確認しており、臨床所見、内視鏡所見との関連性について検討している。
滑液中の浮遊細胞については炎症性メディエイターの発現を遺伝子レベルで解析中である。パンピングにより得られた浮遊細胞からtotal mRNAを回収することに成功した。現在各種炎症性メディエイターのPCRの至適条件を検討中である。浮遊細胞の一部は免疫細胞化学的検索に用い、iNOS、COX-2、IL-1betaについて末梢血と比較検討したが、検出感度が低く、明らかな発現は確認できていないため、高感度な方法を用い、現在検索中である。

Research Products

• [Publications] Hidetaka H,Tetsu T,et al: "Immunohistochemical localization of inducible nitric oxide synthase in synovial tissue of human temporomandibular joints with internal derangement"Archives of Oral Biology. 46. 93-97 (2001)