2001 Fiscal Year Annual Research Report
脂溶性ホルモンによるクロマチン構造変換の分子メカニズムの解析
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12672108
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
柳澤 純 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (50301114)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 茂明 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (60204468)
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| Keywords | 脂溶性ホルモン / クロマチン / エストロゲン / 核内受容体 |
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| Research Abstract |
脂溶性ホルモンであるエストロゲンは、エストロゲン標的組織の細胞内に存在するエストロゲンレセプターに結合する。エストロゲンの結合してエストロゲンレセプター(ER)は、DNA上の特異的な配列に結合し、標的遺伝子の転写を制御することにより、様々な生理作用を現わす。ERの転写制御には、リガンド依存的に結合する一群の蛋白質複合体が必須であることが知られている。これらは、転写を活性化する転写活性化因子複合体と転写を抑制する転写抑制因子複台体に分けられる。
われわれは、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ融合ER蛋白質を用いたカラムを作製し、新規R結合蛋白質複合体を精製した。質量分析による同定により、この蛋白質複合体はTRRAP, GCN5, TAFなどを含み、TRRAPを介して、エストロゲンの結合したERに結合することが明らかとなった。In vitro転写系において、この蛋白質複合体は、ERの転写活性を促進することから、転写活性化因子複合体として機能するものと考えられた。TRRAPのアンチセンスmRNAはERの転写活性を著しく阻害することから、この複合体がERの転写活性化において垂要な役割を担っているものと考えられた。さらに、乳がん由来の細胞株であるMCF7に、このアンチセンスRNAを恒常的に発現させたところ、エストロゲン依存的な乳がん細胞増殖が顕著に抑制された。この抑制はER結合領域を持つが複合体を形成しないTRRAPドミナントネガティブ体を細胞内に導入した場合にも観察されることから、TRRAP/GCN5複合体はエストロゲン依存的な乳がんの増殖に関与している可能性が示された。今後さらに解析を進めることにより、エストロゲン依存的な乳がんの増殖機構が明らかになり、新たな抗がん剤の開発に結びつくのではないかと期待している。
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[Publications] Yanagisawa, J.: "Nuclear receptor requires a TFTC-type histone acetyl transferase complex"Molecular Cell. (印刷中). (2002)
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[Publications] Kitagawa, H.: "Ligand selective potenatiation of rat mineralocorticoid receptor activation function (AF-1) by a CBP-containing HAT complex"Mol. Cell. Biol.. (印刷中). (2002)
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[Publications] Mezaki, Y.: "N-terminal activation function isdominant in ligand-dependent transactivation of medaka estrogen receptor in human cells"B.B.R.C.. 289. 763-768 (2001)
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[Publications] Yamamoto, Y.: "A tamoxifen responsive estrogen receptor alpha mutant D351Y shows reduced tamoxifen-dependent interaction with corepressor complexes"J. Biol. Chem.. 276(46). 42684-42691 (2001)
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[Publications] Watanabe, M.: "A subfamily of RNA binding DEAD-box proteins acts as an estrogen receptor coactivator through the N-terminal activation domain (AF-1) with an RNA coactivator, SRA"EMBO J.. 20. 1341-1352 (2001)
