2001 Fiscal Year Annual Research Report
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12672212
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
中 充子 三重大学, 医学部, 助手 (10093139)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
角田 宏 三重大学, 医学部, 助手 (20314114)
西村 有平 三重大学, 医学部, 助手 (30303720)
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| Keywords | 平滑筋 / S100ファミリー / カルシウム / アクチン / アクチン結合部位 / カルポニン / S100C / アクチン活性化ミオシンATPase |
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| Research Abstract |
我々が独自に見出した新しいカルシウム結合蛋白質S100Cは平滑筋に多く存在する。平滑筋におけるS100Cの標的蛋白質を、ゲルオーバーレイ、アフィニティークロマトグラフィーにより検出したところ、分子量約43、000、33,000のものが見出され、前者はアクチンであり、後者はアネキシンであることが判明した。今回は特に標的蛋白質としてアクチンとの相互作用に焦点を当てて研究し、以下のことが明らかになった。我々はS100Cが平滑筋においてカルシウム存在下にアクチン活性化ミオシンMgATPase活性を濃度依存性に阻害することを明らかにした。その作用はカルモデュリンおよびS100L,S100ao,S100bなどのカルシウム結合蛋白質には認められなかったことからS100Cのアクチン活性化ミオシンMgATPase阻害作用はカルシウム結合蛋白質では特異的なものであると考えられた。さらに、平滑筋に多量存在するアクチン結合蛋白質、カルポニンによるアクチン活性化ミオシンMgATPase阻害作用に対してS100C,カルモデュリンおよびS100L,S100ao,S100bによる回復作用を検討した。その結果、カルモデュリンおよびS100ao,S100bは濃度依存性に回復したがS100Lは効果が認められず、S100Cは相加的に阻害を増加させた。これらのことからS100Cはカルポニンとは異なるアクチン結合部位を持つことが推測された。さらに、S100Cのアクチン結合部位をゼロレングスのクロスリンカー、1-ethyl-3-[3-(dimethylamino)propyl]carbodiimide(EDC)を用いて検討した。クロスリンクの後トリプシン分解し、その分解産物のシーケンスによりアクチンのLys-191とS100CのGlu-44で結合していることが明らかになった。以上の結果からS100Cは平滑筋収縮機構においてアクチン活性化ミオシンMgATPaseの調節を介して、アクチン側からの調節を司っていることが示唆された。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Y.Nishimura: "Calcium-dependent Activation of NFIL3/E4BP4 Gene Expression by Calcineurin/NFAT and CaM kinase Signaling"J.Biol.Chem.. 276(23). 19921-19928 (2001)
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[Publications] J.Morikawa: "Molecular Cloning of Novel Mouse and Human Putative Citrate Lyase β-Subunit"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 289. 1282-1286 (2001)
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[Publications] H.Suzuki: "The Functional Significance of Heme Oxygenase-1 Gene Induction in a Rat"Acta Neurochir[Suppl]. 77. 89-91 (2001)
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[Publications] 中充子: "新世紀の神経薬理ゲノミクス(5)神経薬理プロテオミクス"CLINICAL NEUROSCIENCE別冊(中外医学社). 19(12). 1332-1337 (2001)
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[Publications] 中充子: "心血管病の薬理プロテオミクス"分子心血管病(先端医学社). 2(5). 59-66 (2001)
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[Publications] 田中利男: "血管薬理ゲノミクスとファルマインフォマティクス"日薬理誌(Folia Pharmacol.Jpn.). 118. 52-55 (2001)
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[Publications] 田中利男: "脳の科学 23"星和書店. 11 (2001)
