2000 Fiscal Year Annual Research Report
糖転移酵素のゴルジ装置停留分子システム;停留に関わる分子種の同定と解析
Project/Area Number |
12680620
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Research Institution | Soka University |
Principal Investigator |
西原 祥子 創価大学, 生命科学研究所, 助教授 (00164575)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
成松 久 経済産業省, 産業技術総合研究所・生命工学技術研究所・分子生物部, 主任研究官 (40129581)
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Keywords | 糖転移酵素 / フコース転移酵素 / ゴルジ装置 |
Research Abstract |
ゴルジ装置に局在する糖転移酵素は、2型の膜蛋白質である。N末側を細胞質側に、C末側をゴルジ内腔に向け、C末側の酵素活性領域で、糖脂質や糖蛋白質に対する糖転移反応を行っている。細胞膜や他の細胞内小器官へ向かう蛋白質や脂質の大きな流れに逆らって、糖転移酵素がゴルジ膜に停留するためのメカニズムを明らかにするため、以下の実験を行った。糖転移酵素と細胞骨格蛋白質を結び、ゴルジ装置のどの位置に停留させるかを決めているゴルジレセプター分子(GRP)の存在を想定し、酵母two hybrid systemによる「糖転移酵素と相互作用する分子」のスクリーニングを行っている。フコース転移酵素(FUT1,FUT2,FUT3,FUT4,FUT6)、シアル酸転移酵素(ST3GalI,ST3GalIV)、ガラクトース転移酵素(β1-4GalTI,β1-3GalT5)が発現しているヒト非癌部右半結腸粘膜からcDNAライブラリーを作製し、FUT1(H酵素)をbaitとし、これと弱い相互作用をするクローン約200個を得た。塩基配列を決定し、各種の分子を同定したところ、COP-I.COP-II小胞に関連するいくつかの因子が得られた。これらの分子が、FUT1とゴルジ装置内の局在が似ていると考えられるFUT2(Se酵素)、FUT1よりトランス側にあるFUT3(ルイス酵素)などについても共通の「相互作用する分子」となり得るのか、現在検討中である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Shiina,T. et al: "The beta-1, 3-galactosyltransferase-4 (β3GALT4) gene is located in the centromeric segment of the human MHC class II region."Immunogenetics. 51. 75-78 (2000)
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[Publications] Nakayama,F. et al: "Expression of cutaneous lymphocyte-associated antigen (CLA) regulated by a set of glycosyltransferases in human T cells."J.Invest.Dermatol.. 115. 299-306 (2000)
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[Publications] Kurosawa,N. et al: "Molecular cloning and genomic analysis of mouse GalNAc α2, 6-sialyltransferase (ST6GalNAc I)."J Biochem (Tokyo).. 127. 845-854 (2000)
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[Publications] Shiraishi,N. et al.: "Identification and characterization of three novel β1, 3-N-acetylglucosaminyl-transferases structurally related to the β1, 3-Galactosyltransferase family."J Biol.Chem.. 276. 3498-3507 (2000)
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[Publications] Nakayama,F. et al.: "CD15 expression in mature granulocytes is determined by αl, 3-fucosyltransferase IX (FUT9), but in promyelocytes and monocytes by αl, 3-fucosyltransgerase IV (FUT4)."J Biol.Chem.. (in press). (2001)
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[Publications] Togayachi,A. et al.: "Molecular cloning and characterization of UDP-GlcNAc : lactosylceramide β1, 3-N-acetylglucosaminyltransferase (β3Gn-T5), an essential enzyme for the expression of HNK-1 and Lewis X epitopes on glycolipids."J Biol.Chem.. (in press). (2001)