単層上皮特異的中間径フィラメント蛋白質ケラチン8・18制御機構の解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12680645
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 井澤 一郎 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 主任研究員 (20311441)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 永田 浩一 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 室長 (50252143) ; 稲垣 昌樹 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 部長 (30183007)
• Keywords: 中間径フィラメント / ケラチン / 熱ショック蛋白質 / Mrj / TNF / TRADD

Research Abstract

ケラチン18と結合する蛋白質としてDnaJ/Heat shock protein 40(Hsp40)familyに属するMrj蛋白質およびTNF receptor 1-associated death domain protein(TRADD)を同定した。MrjはそのN末端側のJ domainを介してHeat shock protein 70(Hsp70)と、そしてそのC末端側でケラチン18と結合し、co-chapcroneとしてケラチン8・18フィラメント構築の制御に関与していることを見出した。Wound healing assayにおいて、Mrjは細胞のleading edgeに濃縮し、ケラチン8・18フィラメントのダイナミックなリモデリングを行っている可能性を認めた。中間径フィラメントの構築は、これまで私共が解析を進めてきたリン酸化・脱リン酸化によってgeneralに制御されているが、新しく見出されたMrj-Hsp70による制御は、ケラチン8・18に特異的な制御システムであると考えられた。TRADDはケラチンが発現している上皮細胞では、Type1ケラチンに特異的に結合していることを見出した。ケラチンやビメンチンなどの中間径フィラメントを発現していないSW13細胞にケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)を強制発現させ、TNFによるアポトーシス誘導への影響を観察すると、コントロールベクターに比してケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)をトランスフェクションしたものでは、TNFによるアポトーシス誘導が有意に減弱していた。これらのことより、上皮細胞では、ケラチンは、TRADDとの結合を介して、TNFreceptor1シグナル経路に影響を与えていることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Izawa,I.: "Identification of Mrj, a DnaJ/Heat shock protein 40 family protein, as a keratin 8/18 filament-regulatory protein."Journal of Biological Chemistry. 275(44). 34521-34527 (2000)
• [Publications] Ohtakara,K.: "p21-activated kinase PAK phosphorylates desmin at sites different from those for Rho-associated kinase."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272(3). 712-716 (2000)