血管内皮細胞におけるチロシンキナーゼSykの機能解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12770072
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 柳 茂 神戸大学, 医学部, 助教授 (60252003)
• Keywords: チロシンキナーゼ / Syk / Syk欠損マウス / 血管内皮細胞 / 細胞増殖 / 細胞移動 / アデノウイルス

Research Abstract

Sykは血球系・免疫系細胞に発現する免疫受容体の特異的な初期反応に関与するシグナル分子と考えられているが、Syk欠損マウスの解析の結果、成熟Bリンパ球の欠損のみならず、微小血管からの出血と浮腫および生後直後の致死が観察された。この現象は血球系細胞の機能不全のみでは解釈不能であり、現在、全く原因不明である。そこで、我々はSyk欠損で観察された微小血管からの出血と浮腫は、血管内皮細胞の機能不全によるのではないかと血管内皮細胞におけるSykの機能の解析を試みた。方法としてまずSyk欠損マウスの微小血管における出血、血管拡張、浮腫などの原因と考えられる血管内皮細胞を電子顕微鏡レベルにて詳細に比較検討した。その結果、Syk欠損マウスの血管内皮細胞の形態観察において野生型と比較して著しい発達異常および細胞死が認められた。さらに、Sykドミナントネガティブのアデノウイルスを作製し、血管内皮細胞の増殖・修復におけるSykの役割を解析した。その結果、血管内皮細胞(HUVECs)の増殖刺激によりSykの発現誘導が観察された。また、Sykドミナントネガティブのアデノウイルス感染による過剰発現によりHUVECsの増殖および修復能への著しい抑制効果が認められた。これらの結果よりSyk欠損マウスで観察された微小血管からの出血、血管拡張、浮腫などの原因が血管内皮細胞であることが強く示唆された。今後、さらに血管内皮細胞におけるSykの役割を分子レベルで解析したい。

Research Products

• [Publications] Hitomi,T.: "Requirement of syk-phosphlipase C-γ2 pathway for phorbol ester-induced phospholipase D activation in DT40 cells."Genes Cells. (In press). (2001)
• [Publications] Tsujimura,T.: "Syk protein-tyrosine kinase is involved in neuron-like differentiation of embryonal carcinoma P19 cells."FEBS Lett.. 489. 129-133 (2001)
• [Publications] Yamada,T.: "Protein-tyrosine kinase syk expressed in human nasal fibroblasts and its effect on RANTES production."J.Immunol.. 166(1). 538-543 (2001)
• [Publications] Tsuchida,S.: "Purification of a 72 kDa tyrosine kinase from rat liver and its identfication as Syk : Involvement of Syk in signaling events of hepatocytes."J.Biochem.. 127(2). 321-327 (2000)
• [Publications] Inatome,R.: "Identification of CRAM, a novel unc-33 gene family protein that associates with CRMP3 and protein-tyrosine kinase (s) in the developing rat brain."J.Biol.Chem.. 275(35). 27291-27302 (2000)
• [Publications] Ding,J.: "Syk is required for the activation of Akt survival pathway in B cells exposed to oxidative stress."J.Biol.Chem.. 275(40). 30873-30877 (2000)