ランゲルハンス細胞のIL-12産生制御機構とその意義の解明

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12770424
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 朝比奈 昭彦 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (50202601)
• Keywords: ランゲルハンス細胞 / IL-12 / GM-CSF / TGFβ / 樹状細胞

Research Abstract

はじめにPanning法を用いて、BALB/cマウスの表皮から95%以上の高純度のランゲルハンス細胞(LC)を単離した。このLCを完全培地中で培養したところ、48時間後まで経時的なIL-12p40の産生がELISAで確認されたが、IFN-γあるいは抗CD40抗体によるCD40 ligationの刺激によってその産生が著明に亢進し、また両者の刺激は協調作用を示した。GM-CSFを同時に加えたところ、LCのIL-12p40産生は強力に抑制され、ELISAでみたp40の蛋白レベルのみならず、IL-12依存性の細胞株2D6の増殖によるバイオアッセイでも確認された。RT-PCRにより、IL-12p40の転写レベルでの抑制が示唆された。ケラチノサイトの培養上清も、刺激されたLCからのIL-12産生を抑制し、IL-1αのもとで培養したKCの上清ではさらに強い抑制をみた。この抑制はGM-CSFの中和抗体でブロックでき、IL-12産生の抑制がケラチノサイトの分泌するGM-CSFによることが示された。
次に、LCがTGF-βの受容体を有することをRT-PCRで確認し、TGF-βが、LC表面のICAM-1分子とCD40分子の発現を有意に抑制することをFACSで示した。anti-CD40/IFN-γ刺激下でTGF-βを加えたところ、LCのIL-12p40産生をさらに亢進した。この作用は特にCD40ligationのもとで著明であり、p40蛋白レベルのみならずバイオアッセイでも確認できた。最後に、IL-12産生が、GM-CSFとTGF-βによりそれぞれ独立して調節され、両者のバランスがその最終的な産生量を決定することを示した。皮膚の微小環境に存在する両サイトカインが、Th1-Th2バランスに重要な役割を演ずることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Yayoi Tada,Akihiko Asahina, et al.: "Granule cyte/Macrophage Colony-Stimulating Factor Inhibits IL-12 production of Mouse Langerhans Cells"The Journal of Immunology. 164. 5113-5119 (2000)
• [Publications] Yayoi Tada,Akihiko Asahina, et al.: "Transforming Growth Factor-β Upregulates CD40-engaged IL-12 Production of Mouse Langerhans Cells"The European Journal of Immunology. 31. 294-300 (2001)