2000 Fiscal Year Annual Research Report
蓚酸カルシウム結石発生メカニズムに関する分子生物学的検討
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12770889
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
松尾 光哲 久留米大学, 医学部, 助手 (00258469)
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| Keywords | 蓚酸カルシウム / heparan sulfate / 結石形成ラット腎 / syndecan-1 / in situ hybridization / T-Tダイマー |
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| Research Abstract |
これまで我々は、蓚酸カルシウム結石形成ラット腎においてsyndecan-1(HSPG)が組織内で強く発現していることを証明し、報告してきた。そこで、尿路結石抑制物質の一つであるsyndecan-1(HSPG)をcodeする遺伝子が、腎組織のどの部位に発現するかということを"in situ hybridization"を用いて行った。蓚酸カルシウム結石形成腎のパラフィン切片を用いて、合成オリゴDNAプローブを利用した非放射性in situ hybridization法にてsyndecan-1(HSPG)のmRNAの局在を検討した。プローブはアンチセンスプローブと陰性対照としてのセンスプローブを使用し、mRNAの保存度を検討するための陽性対照として28S rRNAプローブを使用した。あらかじめプローブにはチミン二量体を標識しておき、UV照射することによりプローブはT-Tダイマー化され抗原性標識物質(ハプテン)として働く。その結果、結石形成腎において遠位尿細管(特に結石形成が見られるところ)の上皮細胞に強いシグナルが見られ、syndecan-1(HSPG)の発現が有意に亢進しているものと思われた。この結果は、HSPGの発現亢進が結石形成と密接に関連しており、今後はこの物質が結石形成機転に対しどのような役割を担うのか解明する上で、尿細管上皮を用いた研究へと発展することが期待される。平成13年度は、もうひとつの結石形成に関連するinhibitorであるbikuninについても同様の検討を重ねるとともに、培養細胞を用いた解析もあわせて行う予定である。
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