2000 Fiscal Year Annual Research Report

生理活性物質産生腸内フローラによる疾病の予防と治療

Research Project

Project/Area Number	12877047
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	大西克成徳島大学, 医学部, 教授 (10037400)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中山治之徳島大学, 医学部, 助手 (80294669) 桑原知巳徳島大学, 医学部, 助手 (60263810) 片岡佳子徳島大学, 医学部, 助手 (40189303) 有持秀喜徳島大学, 医学部, 教務員 (30311822)
Keywords	機能性腸内菌 / リコペン産生大腸菌 / ラクトフェリン産生腸内菌 / aberrant crypt foci (ACF) / azoxymethane / プロバイオティクス / ラクトフェリン / Bacteroides uniformis
Research Abstract	プロバイオティクスの応用として、新世代機能性食品素材の創製を目的とし、抗発癌物質を産生する腸内菌を遺伝子工学的手法を用いて作製し、腸管に定着させることで大腸前癌病変aberrant crypt foci(ACF)形成が抑制されるかどうかを検討し、以下の点を明らかにした。 1.土壌細菌Erwinia uredovora由来のリコペン生合成遺伝子を大腸菌-BacteroidesのシャトルベクターpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVEIBを、大腸菌HB101株に形質転換することでリコペン産生大腸菌HB101(pVEIB)株を作製した。 2.大腸菌HB101(pVEIB)株の菌体懸濁液をF344ラットに飲料水として摂取させたところ、ベクター対照株である大腸菌HB101(pVAL-1)株投与群と比べてazoxymethane(AOM)誘発ACF形成が有意に減少した。 3.ヒト由来ラクトフェリン遺伝子をpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVLFKを、Bacteroides uniformis BU1001株に形質転換することでB.uniformis BU1001(pVEIB)株を作製した。900bpのラクトフェリンDNAプローブを用いたノーザンブロットによって2.2kbのラクトフェリンmRNAを、またウサギ抗ヒトラクトフェリン抗体を用いたウエスタンブロットによって80kDaのラクトフェリンタンパク質が合成されていることを確認した。 4.B.uniformis BU1001(pVEIB)株に、大腸菌HB101株に対する増殖抑制作用が認められた。 5.B.uniformis BU1001(pVEIB)株の一夜培養液をF344ラットに飲料水として摂取させたところ、ベクター対照株であるB.uniformis BU1001(pVAL-1)株投与群と比べてAOM誘発ACF形成が有意に減少した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Chiampanichayakul,S. et al.: "Inhibitory effects of bitter melon (Momordica charantia Linn.) on bacterial mutagenesis and aberrant crypt focus formation in the rat colon."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)
[Publications] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of herbal teas and herb extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid upon treatment with nitrite in the presence of ethanol."Environ.Mutagen.Res.. 23(in press). (2001)
[Publications] Kuwahara,T. et al.: "Genetic variation in 16S-23S rRNA internal transcribed spacer regions and the possible use of this genetic variation for molecular diagnosis of Bacteroides species."Microbiol.Immunol.. 45(in press). (2001)
[Publications] Kuwahara,T. et al.: "PCR-dot blot hybridization based on the neuraminidase-encoding gene is useful for detection of Bacteroides fragilis."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)
[Publications] Chone,Y. et al.: "Low susceptibility of Long-Evans Cinnamon rats to N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine-induced urinary bladder carcinogenesis and inhibitory effect of urinary copper."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 16-24 (2001)
[Publications] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of tea extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid on treatment with nitrite in the presence of ethanol."Food Chem.Toxicol.. 38. 7-13 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

生理活性物質産生腸内フローラによる疾病の予防と治療

Principal Investigator

大西 克成 徳島大学, 医学部, 教授 (10037400)

Research Products

[Publications] Chiampanichayakul,S. et al.: "Inhibitory effects of bitter melon (Momordica charantia Linn.) on bacterial mutagenesis and aberrant crypt focus formation in the rat colon."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)

[Publications] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of herbal teas and herb extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid upon treatment with nitrite in the presence of ethanol."Environ.Mutagen.Res.. 23(in press). (2001)

[Publications] Kuwahara,T. et al.: "Genetic variation in 16S-23S rRNA internal transcribed spacer regions and the possible use of this genetic variation for molecular diagnosis of Bacteroides species."Microbiol.Immunol.. 45(in press). (2001)

[Publications] Kuwahara,T. et al.: "PCR-dot blot hybridization based on the neuraminidase-encoding gene is useful for detection of Bacteroides fragilis."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)

[Publications] Chone,Y. et al.: "Low susceptibility of Long-Evans Cinnamon rats to N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine-induced urinary bladder carcinogenesis and inhibitory effect of urinary copper."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 16-24 (2001)

[Publications] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of tea extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid on treatment with nitrite in the presence of ethanol."Food Chem.Toxicol.. 38. 7-13 (2000)

大西克成徳島大学, 医学部, 教授 (10037400)