2002 Fiscal Year Annual Research Report
好中球活性化因子LECTスレセプターのX線結晶構造解析
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13033045
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
鈴木 和男 国立感染症研究所, 生物活性物質部・第三室, 室長 (20192130)
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| Keywords | サイトカイン / LECT2 / 蛋白質高次構造 / 核磁共鳴スペクトル / X線結晶構造解析 / 慢性関節リウヤチ / 遺伝子多型 / 好中球 |
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| Research Abstract |
本研究では、サイトカインLECT2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2)の高次構造解析を、核磁共鳴スペクトル(NMR)とX線結晶構造解析を用いて行った。慢性関節リュウマチ患者においては、LECT2の58番目のVal残基がIle残基に置換されている患者ほど、疾病の重篤度が高いことが明らかになった。LECT2の機能発現に58番目のVal残基のメチレン基1つ分の役割がいかに重要かを明らかにし、LECT2とリュウマチとの因果関係を突きとめる為にLECT2の立体構造を明らかにすることを目的とした。
本研究により、1)NMRを用いた高次構造解析については、安定同位体標識したサンプル調製法の確立とNMR測定とスペクトルの解析を行った。主鎖のスペクトル帰属はほぼ完了し、二次構造情報まで得られた。
2)X線結晶構造解析については、動物細胞による発現系を用いて前年度から引き続き進めており、位相決定に向けて結晶化条件の精密化を行った。その結果、以前よりも大きく良質な結晶を得ることに成功した。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Mie Ito, Oda, Yamagoe S., Suzuki K, Tanokura, M.: "Expression, oxidative refolding and characterization of six-histidine-tagged recombinant human LECT2, a 16 kDa chemotactic protein with three disulfide bonds"Protein Expression Purif.. 27(2). 272-278 (2003)
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[Publications] Frederik Vilhardt, Olivier Plastre, Makoto Sawada, Kazuo Suzuki, Maciej Wiznerowicz, Etsuko Kiyokawa, DidierTrono, Karl-Heinz Krause: "The HIV-1 Nef Protein and Phagocyte NADPH Oxidase Activation"J Biol.Chem. 277. 42136-42143 (2002)
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[Publications] Aratani, Y., Kura, F., Watanabe, H, Akagawa, H., Takano, Y, Suzuki, K., Dinauer, M.C., Maeda, N., Koyama, H: "Relative contributions of myeloperoxidase and NADPH-oxidase to the early host defense against pulmonary infections with Candida albicans and Aspergillus fumigatus"Med.Mycol. 40. 557-563 (2002)
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[Publications] Kohji Ichimori, Naoto Fukuyama, Hiroe Nakazawa, Yasuaki Aratani, Hideki Koyama, Shunya Takizawa, Yosuke Kmeoka, Akiko Ishida-Okawara, Fumikazu Kohi, Kazuo Suzuki: "Myeloperoxidase has directly-opposed effects on nitration reaction -study on myeloperoxidase-deficient patient and myeloperoxiclase-knockout mice"Free Radical Research.. (in press).
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[Publications] Aratani, Y, Kura, F., Watanabe, H, Akagawa, H., Takano, Y, Suzuki, K., Dinauer, M.C., Maeda, N., Koyama, H: "Critical role of myeloperoxidase and NADPH-oxidase in high-burden systemic infection of mice 4th Candida albicans"J.Infect.Dis. 185. 1833-1837 (2002)
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[Publications] 鈴木和男: "SCG/KjマウスとANCA関連血管炎-血管炎病態に関与する好中球機能:動物モデルを用いた解析から-"リウマチ科. 28. 570-577 (2002)
