2004 Fiscal Year Annual Research Report
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13043058
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| Research Institution | Kyoto Institute of Technology |
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Principal Investigator |
山口 政光 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (00182460)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 雅信 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (60221082)
廣瀬 富美子 兵庫県立大学, 大学院・理学研究科, 助教授 (60208882)
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| Keywords | 細胞増殖 / 分化 / DREF / Cut / クロマチン免疫沈降法 / 複製遺伝子 / ショウジョウバエ / 転写因子 |
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| Research Abstract |
ショウジョウバエのDNA複製関連遺伝子を統合的に転写制御するエレメントとして、DRE(DNA複製関連エレメント)、E2F結合サイト、CFDD結合サイト等が存在している。これらのエレメントには、DREF(DRE結合因子)、E2F・DP複合体、CFDD(複製遺伝子/DREF遺伝子共通制御因子)等の転写因子がそれぞれ結合する。このうちDRE/DREF制御システムは、細胞周期制御因子サイクリンAやシグナル伝達因子Rafの発現をも制御しており、ショウジョウバエの複製・増殖関連遺伝子のマスター制御因子のひとつである。
PCNA(増殖細胞核抗原)遺伝子プロモーターに存在するDREをおとりとして、酵母one-hybridスクリーニングを行ない、DREに結合する因子のcDNAクローニングを試みた。その結果DREFの他にCutが結合因子として同定された。Cutは3つのホメオドメインと1つのCutドメインというそれそれ独立して機能しうる4つのDNA結合ドメインを持つユニークな転写因子であり、形態形成過程に於いて細胞分化を誘導する因子として知られている。Cutはin vitorでDREに結合しうることを、ショウジョウバエKc細胞核抽出液と抗Cut抗体を用いたゲルシフトアッセイにより示した。ショウジョウバエS2細胞に二本鎖RNAを導入してDREFをノックダウンするとPCNAプロモーター活性が低下するが、Cutをノックダウンすると逆にPCNAプロモーター活性が上昇した。このことはCutが、DREFに対して拮抗的に作用し、PCNAプロモーター活性に抑制的に働いていることを示唆する。また抗DREF抗体と抗Cut抗体を用いたクロマチン免疫沈降法により、増殖中の細胞では、主としてDREFがゲノム上のPCNAプロモーター領域に結合し、一方βエクダイソンにより増殖停止して分化誘導が起こった細胞では主としてCutがPCNAプロモーター領域に結合していることが示唆された。この細胞分化に伴うDREFからCutへの乗り換え現象は、増殖と分化の切り換えの仕組みを考える上で重要である。
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] Characterization of dRFX2, a novel RFX family protein in Drosophila.2004
Author(s)
Otsuki, K., Hayashi, Y., Kato, M., Yoshida, H., Yamaguchi, M.
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Journal Title
Nucleic Acids Res. 32
Pages: 5636-5648
Description
「研究成果報告書概要(和文)」より
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[Journal Article] Armadillo/ Pangolin regulates PCNA and DREF promoter activities.2004
Author(s)
Kwon E., Hayashi, Y., Otsuki, K., Hirose, F., Nishida, Y., Yoo, M.-A., Yamaguchi, M.
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Journal Title
Biochem.Biophys.Acta. 1670
Pages: 1024-1031
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[Journal Article] DREF is required for EGFR signaling during Drosophila wing vein development2004
Author(s)
Yoshida, H., Kwon, E., Hirose, F., Otsuki, K., Yamada, M., Yamaguchi, M.
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Journal Title
Genes to Cells 9
Pages: 935-944
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[Journal Article] Transcriptional regulation of the Drosophila caudal homeobox gene by the DRE/DREF system.2004
Author(s)
Choi, Y.-J., Choi, T.-Y., Yamaguchi, M., Matsukage, A., Kim.Y.-S., Yoo, M.
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Journal Title
Nucleic Acids Res. 32
Pages: 3734-3742
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