2001 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
13137207
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
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Research Institution | The University of Tokushima |
Principal Investigator |
石田 甫 徳島大学, 歯学部, 教授 (70028364)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
飯田 博一 徳島大学, 歯学部, 助手 (10335797)
石川 康子 徳島大学, 歯学部, 助教授 (40144985)
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Keywords | 水チャネル / アクアポリン-5 / アクアポリン-8 / 唾液腺 / M3ムスカリン受容体 / 細胞内カルシウム濃度 / NO合成酵素 / cGMP |
Research Abstract |
耳下腺管腔膜に局在する水輸送体AQP5増量を誘導する細胞内情報伝達系の検索を、本年度は主に行い、下記のような成果を得た。 8週齢ラットより耳下腺切片を調製し、acethycholine(ACh)、epinephrine(Epi)、cis-2-methylspiro-(1,3-oxathiolane-5,3')-quinuclidine(SNI-2011)やpilocarpineをはじめ諸種薬物とKrebs Ringer Tris(KRT)液(pH7.4)中で37℃にて15秒から30分間加温振盪した後、LongbottomらやVayroらの方法を応用して基底膜,管腔膜,細胞内小胞膜等に細胞分画する。SDS-PAGEに供した後、ニトロセルローズ膜に転写し、C末側アミノ酸配列を用いて調製した抗AQP5抗体を使ってウェスタンブロッティングを行い、デンシトメーターにて解析した。 1.AChやpilocarpineによる耳下腺管腔膜におけるAQP5の増量はGF109203Xによって阻止されず、U73122、Carboxy-PTIOによって阻止された。 2.dbcGMP, SIN-1,SNAP, Atriopeptin Sodium azide単独によってもAQP5の増量は誘導され,KT5823によって阻止された。 3.AChやpilocarpineによる耳下腺管腔膜におけるAQP5の増量はKN-93,L-Nil, ODQ, ML-9によって阻止された。 4.AChやEpiによる耳下腺管腔膜におけるAQP5の増量はTubulozole-C, Cytochalasin Dによって阻止された。 5.細胞外Ca^<2+>の存在下AChによる耳下腺管腔膜におけるAQP5の増量は3.8倍、細胞外Ca^<2+>の非存在下AChによる耳下腺管腔膜におけるAQP5の増量は2倍であり、また、dbcGMP,によってるAQP5の増量はBAPTA-AMによって阻止された。 以上のことから、耳下腺管腔膜のAQP5の機能の発現には神経系が関与しており、細胞内情報伝達系として細胞内Ca^<2+>上昇によって誘導されるNitric oxide synthetase/Soluble guanyl cyclase系の関与が示唆された。
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Research Products
(17 results)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "Activation of endogenous nitric oxide synthase coupled with methacholine induced exocytosis in rat parotid acinar cells"J.Pharmacol. Exp. Ther.. Vol.301 No.1. 1-9 (2002)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "Regulation of Gi2α phoshporylation controls isoprenaline-induced super-sensitivity and desensitization of amylase secretion in rat parotid glands"9^<th> International Catecholamine Symposium. 44 (2001)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "Neurotransmitters regulate amount of AQP5 in apical membrane of parotid"Journal Dental Research. Vol.80. 600 (2001)
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[Publications] Hajime Ishida: "Phosphorylation/dephosphorylation of Gi regulates desensitization/supersensitivity in response to β2-adrenergic agonist"Journal Dental Research. Vol.80. 676 (2001)
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[Publications] Noriko Inoue: "SNI-2011-induced persistent increase in the amount of AQP5 in APM"Journal Dental Research. Vol.80. 676 (2001)
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[Publications] 石川康子: "耳下腺のAQP5とAQP8の神経性調節"歯科基礎医学会雑誌. Vol.43,No.5. 551 (2001)
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[Publications] 石田甫: "コリン作動薬による耳下腺腺房細胞におけるNOとcGMPの生成とアミラーゼ分泌"歯科基礎医学会雑誌. Vol.43,No.5. 588 (2001)
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[Publications] 井上紀子: "糖尿病と唾液腺分泌磯能の変化"歯科基礎医学会雑誌. Vol.43,No.5. 588 (2001)
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[Publications] 石川康子: "SNI-2011による持続性唾液分泌と水チャネルAQP5の連関性"日本唾液腺学会誌. 42. 39-42 (2001)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "The activation of NO/cGMP signal transduction induces the increase in AQP5 levels in the apical plasma membrane in rat parotid glands"Japanese Journal of Pharmacology. Vol.81,Suppl. 221 (2002)
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[Publications] Hirokazu Iida: "Activation of endogenous NOS coupled with methacholine(MCh)-induced amylase secretion exocytosis in rat parotid acinar cells"Japanese Journal of Pharmacology. Vol.81,Suppl. 174 (2002)
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[Publications] Hajime Ishida: "Regulation of phosphorylation status of Gi2α couples with β2-adrenergic agonist-induced desensitization and supersensitivity"XIVth International Congress of Pharmacology. (in press). (2002)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "Activation of endogenous nitric oxide synthase coupled with methacholine-induced exocytosis in rat parotid acinar cells"XIVth International Congress of Pharmacology. (in press). (2002)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "The ACh-and pilocarpine-induced increase in AQP5 levels in the APM in rat parotid acinar cells is coupled with activation of..."XIVth International Congress of Pharmacology. (in press). (2002)
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[Publications] 石田甫: "「顎関節症入門」薬物療法 編著;森本俊文, 松矢篤三, 野首孝祠, 小林義典"医歯薬出版株式会社. 249 (2001)
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[Publications] Yasuko Ishikawa: "「Molecular biology and physiology of water and solute transport」 Edited by Stefan"Kluwer Academic/Plenum Publishers, London, UK.. 451 (2001)
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[Publications] Hajime Ishida: "「Histamine Research in the New Millennium」 Edited by Takehiko Watanabe, Henk Timmerman and Kazuhiko Yanai"Elsevier Science Publishing Co, Amsterdam, The Netherlands. 521 (2001)