2002 Fiscal Year Annual Research Report

パターン認識蛋白質の構造機能解析

Research Project

Project/Area Number	13143203
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	川畑俊一郎九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (90183037)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	河野敬一富山医科薬科大学, 薬学部, 教授 (10136492)
Keywords	自然免疫 / NMR / 抗菌蛋白質 / ヘモシアニン / キチン結合蛋白質 / 異物認識
Research Abstract	抗菌ペプチドのタキスタチンAのNMRによる立体構造を決定した。さらに、抗菌ペプチドであるタキサイチンのリコンビナント蛋白質の発現を行って、その立体構造をNMRで解析することで、キチン結合に関するドメインや抗菌活性に関与するアミノ酸残基を特定した。また、カブトガニ顆粒細胞は、LPSに対して瞬時に反応し開口放出を引き起こすが、開口放出は遺伝子発現を必要としない反応であり、さらに、カブトガニにおいては、Toll様受容体が顆粒細胞だけでなく非特異的に種々の組織に発現していることから、顆粒細胞には開口放出に関与する新規のLPS受容体の存在が推定された。そこで、大顆粒成分のコアギュローゲンやタキレクチン-2に対する抗体を用いて開口放出を定量的に測定する方法を確立し、顆粒細胞のLPS受容体の機能を解析した。その結果、顆粒細胞においては、LPS刺激がG蛋白質を経由していることを見いだした。さらに、種々のカブトガニ生体防御因子に対する抗体を用いたFACScanによる解析の結果、興味深いことに、大顆粒成分であるFactorCに類似した抗原が細胞表面に存在することが明らかとなった。FactorCは、LPSと特異的に結合してセリンプロテアーゼ活性を発現する前駆体で、体液凝固カスケードの開始因子である。したがって、この抗原がLPS認識の受容体として細胞膜上で機能している可能性が高い。一方では、節足動物における外骨格形成の分子機構を解明する目的で、カブトガニ外骨格からキチン結合蛋白質を網羅的に精製し、すべてのキチン結合蛋白質のアミノ酸配列の部分配列を決定するとともに、cDNAクローニングを進めており、現段階で10種類の新規キチン結合蛋白質の全アミノ酸配列が判明している。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Takaki, Y.et al.: "Duplicated binding site for 1, 3 β-D-glucan in the horseshoe crab coagulation factor G : Implication s for a molecular basis of the pattern recognition in innate immunity"J. Biol. Chem.. 277・16. 14281-14287 (2002)
[Publications] Fujitani, N.et al.: "Structure of the antimicrobial peptide tachystatin A"J. Biol. Chem.. 277・26. 23651-23657 (2002)
[Publications] Gregorio, E.D.et al.: "An immune responsive serpin regulates the melanization cascade in Drosophila"Develop. Cell. 3巻. 581-592 (2002)
[Publications] Suetake, T.et al.: "Production and characterization of recombinant Tachycitin, the chitinbinding protein"Protein Engineering. 15巻. 736-769 (2002)
[Publications] Kawabata S., Tsuda R.: "Molecular basis of non-self recognition by the horseshoe crab tachylectins"Biochim. Biophys. Acta. 1572巻. 414-421 (2002)
[Publications] Osaki, T.et al.: "Proline-rich cell surface antigens of horseshoe crab hemocytes are substrates for protein cross-linking with a clotting protein coagulin"J. Biol. Chem.. 277・42. 40084-40090 (2002)
[Publications] Kawabata S.et al.: "Innate Immunity"Humana Press Inc.. 432 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

パターン認識蛋白質の構造機能解析

Principal Investigator

川畑 俊一郎 九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (90183037)

Research Products

[Publications] Takaki, Y.et al.: "Duplicated binding site for 1, 3 β-D-glucan in the horseshoe crab coagulation factor G : Implication s for a molecular basis of the pattern recognition in innate immunity"J. Biol. Chem.. 277・16. 14281-14287 (2002)

[Publications] Fujitani, N.et al.: "Structure of the antimicrobial peptide tachystatin A"J. Biol. Chem.. 277・26. 23651-23657 (2002)

[Publications] Gregorio, E.D.et al.: "An immune responsive serpin regulates the melanization cascade in Drosophila"Develop. Cell. 3巻. 581-592 (2002)

[Publications] Suetake, T.et al.: "Production and characterization of recombinant Tachycitin, the chitinbinding protein"Protein Engineering. 15巻. 736-769 (2002)

[Publications] Kawabata S., Tsuda R.: "Molecular basis of non-self recognition by the horseshoe crab tachylectins"Biochim. Biophys. Acta. 1572巻. 414-421 (2002)

[Publications] Osaki, T.et al.: "Proline-rich cell surface antigens of horseshoe crab hemocytes are substrates for protein cross-linking with a clotting protein coagulin"J. Biol. Chem.. 277・42. 40084-40090 (2002)

[Publications] Kawabata S.et al.: "Innate Immunity"Humana Press Inc.. 432 (2002)

川畑俊一郎九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (90183037)