ヒト腎疾患に対する遺伝子レベルの診断法の確立と治療法の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13204030
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 下条 文武 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (20126410)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 黒田 毅 新潟大学, 医学部附属病院, 医員 ; 風間 順一郎 新潟大学, 医学部附属病院, 医員 ; 坂爪 実 新潟大学, 医学部附属病院, 助手 (70334662)
• Keywords: DNAマイクロアレイ / 発現遺伝子プロファイル / クラスタリング / 糸球体腎炎 / 腎生検 / ループス腎炎 / ネフローゼ症候群 / 腎疾患

Research Abstract

糸球体腎炎モデル(ラット半月体形成性腎炎)を用いてDNAマイクロアレイ(GeneChip^<TM> : RatGenomeU34A)解析の後、階層的クラスタリングを行った。その結果、細胞外基質と分解酵素(metalloproteinase)遺伝子群の同期した特徴ある発現が観察された。この中から、in situ hybridizationによって発現部位を確認し、病態形成に重要と考えたmetalloproteinaseの1つに着目して抗血清を作成、投与し、その役割を検討している(論文準備中)。また、尿細管障害部位では、OsteopontinとそのレセプターCD44の回復過程への関与を解明した。MRL^<lpr>マウス腎炎(ループス腎炎)では、発現が増強した遺伝子群のうち免疫機能分子の3遺伝子に注目して、in situ hybridizationによる発現部位の特定を行っている。これら2つの腎炎モデルでは、各々特徴的な遺伝子発現様式が観察され、疾患特異性が認められた。
一方、動物モデルでの解析を基に、当研究施設の特徴と言える豊富な臨床サンプルを利用して、ヒト腎疾患での解析を進めている。これまでにヒトの腎炎病変部にTh1型サイトカインを発現するエフェクターT細胞を同定し、腎細胞の炎症性変化を情報伝達系をターゲットとして抑制し治療的応用性を示した。またネフローゼ症候群患者検体(8例)の末梢血免疫細胞での発現遺伝子データを得、疾患特異的に発現する遺伝子群を絞りこんでいる。さらに、ラット腎炎モデルで針腎生検を行い、得られた1μg以下の微量RNAからmRNAを増幅(T7-based RNA amplification)してDNAマイクロアレイ解析を行った。wholeの腎組織から得た遺伝子発現プロファイルと近似したデータを得ることができ、ヒト腎生検標本での発現遺伝子のプロファイリングを進めている。

Research Products

• [Publications] Minoru Sakatsume: "Human glomerulonephritis accompanied by active cellular infiltrates shows effector T cells in urine"Journal of the American Society of Nephrology. 12. 2636-2644 (2001)
• [Publications] Minoru Sakatsume: "Down-regulation of interferon-γ signaling by gene transfer of Statl mutant in mesangial cells"Kidney International. 57. 455-463 (2000)
• [Publications] Yuansheng Xie: "Expression, roles, receptors, and regulation of osteopontin in the kidney"Kidney International. 60. 1645-1657 (2001)