リンパ球系悪性腫瘍における細胞周期及び放射線感受性制御の分子機構解析

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13216069
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 南 康博 神戸大学, 医学部, 教授 (70229772)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 依田 成玄 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70335454) ; 大石 勲 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (50314472)
• Keywords: リンパ球 / H-Ras / c-Myc / HIF1 / DNA損傷応答 / 癌抑制遺伝子産物 / Chk2キナーゼ / Wip1ホスファターゼ

Research Abstract

本年度の研究においては、まず癌遺伝子産物であるH-Ras(H-RasV12)とc-Mycの協調作用を解析する目的で、これらの分子を単独あるいは両者を構成的に発現するリンパ球系細胞株を用いて、細胞接着能及び低酸素状態に対する感受性を比較検討した。その結果、(1)H-Ras, c-Myc両者を発現する細胞株においては、ラミニンの受容体であるalpha6インテグリンが(主に転写レベルでの制御により)発現抑制されており、実際ラミニン接着性が殆ど消失していること、また(2)この細胞株では、レポーターアッセイの結果HIF1の転写活性化能が顕著に亢進していること、また実際塩化コバルトにより引き起こされた低酸素状態によるアポトーシス誘導に対して耐性になっていることが見出された。次に、癌抑制遺伝子産物であるChk2キナーゼのDNA損傷時における機能を明らかにする目的で、既にyeast two hybridスクリーニングによりChk2と会合することが示唆されていたWip1ホスファターゼとChk2キナーゼとの物理的・機能的連関について、特にリン酸化・脱リン酸化による制御を念頭に置いて、細胞生物学的・生化学的解析を行った。その結果、Chk2とWip1が会合し、実際両分子が核内において共局在することが見出された。また、DNA損傷時にChk2のThr68が(ATMキナーゼまたは自己リン酸化により)リン酸化を受けることがその活性化に重要であることが知られていたが、Wip1がリン酸化を受けたThr68を脱リン酸化することが明らかとなった。さらに、DNA損傷時の細胞応答におけるChk2キナーゼの多彩な機能を解明する目的で、体系的なyeast two hybridスクリーニングを行い、Chk2と会合しうる分子として新たにPAPSS1、AF10、UMP/CMPキナーゼを同定することに成功した。

Research Products

• [Publications] Oisbi, I.: "Critical role of a C. elegans homolog of Cdsl/Chk2-related kinase. Ce-CDS-1. in meiotic recombination"Mol. Cell. Biol.. 21. 1329-1335 (2001)
• [Publications] Fujimoto, H.: "Down-regulation of α6 an integrin, an antioncogene product, by functional cooperation of H-Ras and c-Myc"Genes to Cells. 6. 337-343 (2001)
• [Publications] Huang, J-Y.: "Differential interaction of Cbl with Grb2 and Crk in CD2-mediated NK cell activation"Molecular Immunol. 37. 1057-1065 (2001)
• [Publications] Matsuda, T.: "Expression of the receptor tyrosine kinase genes, Ror1 and Ror2, during mouse development"Mech. Dev.. 105. 153-156 (2001)
• [Publications] Umehara, H.: "Fractalkine, a CX3C-chemokine, functions predominantly as an adhesion molecule in monocytic cell line THP-1 cells"Immunology and Cell Biol.. 79. 298-302 (2001)
• [Publications] Susilowati, R.: "Distribution of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase I beta 2 in the central nervous system of the rat"Brain Res.. 911. 1-11 (2001)
• [Publications] Nomi, M.: "Loss of mRor1 enhances the heart and skeletal abnormalities in mRor2 deficient mice: redundant and pleiotropic functions of mRor1 and mRor2 receptor tyrosine kinases"Mol. Cell. Biol.. 21. 8329-8335 (2001)
• [Publications] Umehara, H.: "Role for adapter proteins in costimulatory signals of CD2 and IL-2 on NK cell activation"Molecular Immunol.. 38. 587-596 (2001)
• [Publications] Iwai, K.: "Physical interaction of Dmnk protein and mRNA with Orb protein: implication in the regulated localization of Dmnk by Orb duringoogenesis and embryogenesis"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 290. 225-229 (2002)
• [Publications] Iida, T.: "Hypoxia-inducible factor-1α induces cell cycle arrest of endothelial cells"Genes to Cells. (in press). (2002)