2001 Fiscal Year Annual Research Report
DNAメチル化を用いた遺伝子診断法による早期診断法の確立
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13218110
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
伊東 文生 札幌医科大学, 医学部, 講師 (90223180)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 幸成 札幌医科大学, 医学部, 助手 (60311411)
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| Keywords | 消化器癌 / メチル化 / MCA法 / アポトーシス / 潰瘍性大腸炎 |
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| Research Abstract |
MCA(methylated CpG island amplification)法を用いて、大腸癌細胞、膵癌細胞などより、メチル化のターゲット遺伝子の断片を100種類以上単離することに成功した。これらの断片より、プロモーター領域がメチル化することにより発現が低下する新規遺伝子として、カルシウムチャンネルに関連するCACNAIG遺伝子、アポトーシスに関連するHRK遺伝子、細胞周期に関連するCHFR遺伝子などを新規にクローニングすることに成功し得た。これらの遺伝子について、消化器癌細胞および消化器癌組織を用いてDNAメチル化の頻度をCOBRA(Combined bisulfite restriction analysis)法や、我々の開発したbisulfite-SSCP法を用いて検討を行った。いずれの遺伝子も消化器癌において高頻度にメチル化しかつ発現低下も認められること、この結果は種々の遺伝子に高頻度にメチル化を認める腫瘍(CpG island methylator phenotype-CIMP)においてさらに顕著であった。さらに、長期経過例の潰瘍性大腸炎の前癌病変である高度異型上皮において、加齢と共にメチル化の程度が亢進する遺伝子群(p16遺伝子exon1,MYOD遺伝子、ER遺伝子、CSPG2遺伝子)が高頻度にメチル化されていること、また、きわめて興味深いことに高度異型上皮を伴う潰瘍性大腸炎の非腫瘍部粘膜においても高頻度にメチル化していることが明らかになった。
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[Publications] Kikuchi T: "Regional methylation and histone deacethylation of p57KIP2 associated with gene silencing in human tumors"Oncogene. (in press). (2002)
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[Publications] Yamamoto H: "Differential involvement of the hypermethylator phenotype in hereditary and sporadic colorectal cancers with high-frequency microsatellite instability"Genes Chromosomes Cancer. (in press). (2002)
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[Publications] Sasaki Y: "Increased expression of t-fimbrin gene after DNA damage in cho cells and inactivation of t-fimbrin by CPG methylation in human colorectal cancer cells"Int.J.Cancer. 97・2. 211-216 (2002)
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[Publications] Itoh F: "Aberrant methylation and histone deacetylation of cyclooxy genese 2 in gastric cancer"Int.J.Cancer. 97・3. 272-277 (2002)
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[Publications] Yamamoto H: "Expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in human pancreatic adenocarcinomas:clinicopathologic and prognostic significance of matrilysin expression"Journal of Clinical Oncology. 19・4. 1118-1127 (2001)
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[Publications] Yamamoto H: "Genetic and clinical features of human pancreatic ductal adenocarcinomas with widespread microsatellite instability"Cancer Research. 61・7. 3139-3144 (2001)
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[Publications] 伊東文生: "細胞工学"秀潤社. 7 (2001)
