2003 Fiscal Year Annual Research Report
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13460051
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
中原 義昭 東海大学, 工学部, 教授 (50087574)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北條 裕信 東海大学, 工学部, 助教授 (00209214)
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| Keywords | 等鎖合成 / 糖ペプチド / 固相合成 / O-結合型糖鎖 / コアクラス2型糖鎖 / N-結合型糖鎖 / ロイコシアリン / エムプリン |
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| Research Abstract |
前年度までに、O-結合型糖鎖の機能解明のための基礎研究としてコア2型糖鎖の4糖性ビルディングブロックおよびそれを用いたヒトT細胞膜糖タンパク質ロイコシアリン215-224のデカペプチド固相合成を行った。この過程で糖鎖保護基であるベンジル基はlow acidity TfOHの条件下高効率で脱保護ができることを明らかにした。本年度はコア2型糖鎖に働くシアル酸転移酵素によるシアル酸残基の導入研究を行った。コア2型にシアル酸を転移する2種の酵素はいずれも市販されている。先に合成した4糖性ビルディングブロックを脱保護しシアリル化反応を試したところ、いずれの酵素も高い転移効率を示しそれぞれガラクトース3位へ特異的にシアル酸を転移した。2つの酵素を混合した系では一層高い変換効率で6糖性化合物が得られた。これらの基礎実験をもとに上記ロイコシアリン215-224糖ペプチドを酵素的にシアリル化した。過剰のCMP-シアル酸を用いて一挙にシアリル化を行ったところ定量的に6糖への変換がなされた。これにより懸案であったコア2型糖鎖の効率的な合成法を確立することができた。エムプリンはガン転移メカニズムの初期過程に関わるガン細胞がつくる糖タンパク質であり、繊維芽細胞のコラゲナーゼ産生を促す。本研究では61アミノ酸とN-結合型からなるその機能性ドメインの化学合成を研究してきたが、これまでにキトビオースを結合したドメインの合成に成功しており、合成サンプルがコラゲナーゼ産生促進活性を有することを見いだした。本年度はより糖鎖構造の複雑な、N-結合型糖鎖の基本構造である5糖が結合した同ドメインの化学合成に成功した。本研究対象となる化合物はペプチドと呼べるサイズをすでに超えており、現在までに純化学合成で作られた最大の分子である。この研究ではペプチドセグメントの改良合成と縮合法の活用がその成果をもたらした。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] H.Hojo, E.Haginoya, Y.Matsumoto, Y.Nakahara, K.Nabeshima, B.P.Toole, Y.Watanabe: "The first synthesis of peptide thioester carrying N-linked core pentasaccharide through modified Fmoc thioester preparation : Synthesis of an N-glycosylated Ig domain of emmpin."Tetrahedron Lett.. 44. 2961-2964 (2003)
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[Publications] Y.Tanaka, Y.Nakahara, H.Hojo, Y.Nakahara: "Studies directed toward the synthesis of protein-bound GPI anchor"Tetrahedron. 59. 4059-4067 (2003)
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[Publications] Y.Takano, N.Kojima, Y.Nakahara, H.Hojo, Y.Nakahara: "Solid-phase synthesis of core 2 O-linked glycopeptide and its enzymatic sialylation"Tetrahedron. 59. 8415-8427 (2003)
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[Publications] Y.Nakahara, T.Nonaka, H.Hojo, Y.Nakahara: "Synthesis if an Unnatural N-Glycan-linked Dolichyl Pyrophosphate Precursor"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 67. 1761-1766 (2003)
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[Publications] T.Takahara, H.Hojo, Y.Nakahara, T.Ishimizu, S.Hase: "Application of Fmoc-amino acid carrying an unmasked carbohydrate to the synthesis of the epidermal growth factor-like domain of bovine blood coagulation factor IX"Org.Biomol.Chem.. 2. 133-136 (2004)
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[Publications] Y.Nakahara: "Problems and Progress in Glycopeptide Synthesis"Trends in Glycoscience and Glycotechnology. 15. 257-273 (2003)
