フロン代替溶剤の毒性解明と新しい分子、生物マーカーを用いたリスクアセスメント

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470088
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 市原 学 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (90252238)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 前多 敬一郎 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (30181580) ; 柴田 英治 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90206128) ; 上島 通浩 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (80281070) ; 束村 博子 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (00212051)
• Keywords: 1-ブロモプロパン / フロン代替溶剤 / 神経毒性 / 生殖毒性 / 質量分析 / 連続切片 / 卵巣 / メルカプツレート

Research Abstract

1.40匹のWistar系非妊娠雌ラットを4群に分け、3群に200,400,800ppmの1-BPを一日8時間、週7日間で12週間吸入曝露し、対照群には新鮮空気のみを吸入させた。性周期を調べるために膣スメアを毎日採取した。曝露終了後、断頭・解剖した。卵巣は10%緩衝ホルマリン固定、パラフィン包埋を行い、8μm厚の連続切片を作成し、HE染色を行った。5枚ごとの切片について正常形態の卵胞数を計測した。性周期は800ppm群で曝露第4〜6週頃から不規則となり、第7〜9週には全てのラットで不規則となるかまたは停止した。400ppm群では曝露第7〜9週頃から不規則となるラットが有意に増加した。200ppm群では性周期への有意な影響はみられなかった。卵巣卵胞数の検討では、400ppm群で成長卵胞・濾胞卵胞の有意な減少が認められたが、始原卵胞には有意な数の変化はなかった。200ppm群では濾胞卵胞の有意な減少がみられた。本研究の結果からは1-BPの生殖障害の機序として、卵胞細胞の成熟過程の障害し、2-BPとは異なる機序で卵巣機能を障害することが示された。
2.Wistar系雄ラット36匹を8匹ずつ4群に分け、50ppm、200ppm、800ppmの1-BPおよび新鮮空気を1日8時間チャンバー内で曝露し、曝露中排泄尿を代謝ケージにて採取した。尿を酢酸エチルにて2回抽出した後、遠心濃縮機にて乾固し、酢酸エチルに再溶解後、N-tert-butyldimethylsilyl-N-methyltrifluoroacetamideを用いてtert-butyldimethylsilyl誘導体化し、GC-MSにて定量した。内部標準としてN-Acetyl-S-(d7 propyl)cysteineを用いた。ラットの尿中N-Acetyl-S-propylcysteineは1-BP曝露濃度に依存して増加した。尿中N-Acetyl-S-propylcysteineは1-BP曝露の指標として有効であることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Ichihara G et al.: "Neurological disorders in three workers exposed to 1-bromopropane"Journal of Occupational Health. 44. 1-7 (2002)
• [Publications] Wang H et al.: "Biochemical changes in the central nervous system of rats exposed to 1-bromopropane for seven days"Toxicological Sciences. 67. 114-120 (2002)
• [Publications] Wang H et al.: "Dose-dependent biochemical changes in rat central nervous system after 12 week exposure to 1-bromopropane"Neurotoxiclogy. 24. 199-206 (2002)
• [Publications] Yamada T et al.: "Exposure to 1-bromopropane canses ovarian dysfunction in rats"Toxicological Sciences. 71. 96-103 (2003)
• [Publications] 市原学 ほか: "有機溶剤中毒"総合臨牀. 51. 768-773 (2002)
• [Publications] 市原学 ほか: "毒性学入門"産業衛生学雑誌. 44. 70-71 (2002)
• [Publications] Nakajima T et al.: "Functional activation of peroxisome proliferator-activated receptor α(PPARα)byenvironmental chemicals in relation to their toxicities"Nagoya Journal of Medical Sciences. 65. 85-94 (2002)
• [Publications] Nakajima T et al.: "Generalized skin reactions in relation to trichloroethylene exposure : A review from the viewpoint of drug-metabolizing enzymes"Journal of Occupational Health. 45. 8-14 (2003)
• [Publications] 久永直見 ほか: "トリクロロエチレンおよびテトラクロロエチレンに曝露された労働者に発生する急性肝炎を伴うスチーブンス・ジョンソン症候群"産業衛生学雑誌. 44. 33-49 (2002)
• [Publications] Takagi A. et al.: "Involvement of caspase 3 mediated apoptosis in hematopoie tic cytotoxicity of metabolites of ethylene glycol monomethyl ether"Industrial Health. 40. 371-374 (2002)