2001 Fiscal Year Annual Research Report
New in vivo心筋細胞アポトーシスモデルの開発とBc1-2遺伝子治療
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13470143
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
藤原 久義 岐阜大学, 医学部, 教授 (80115930)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小戝 健一郎 岐阜大学, 医学部, 助教授 (90258418)
竹村 元三 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (40283311)
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| Keywords | 成人ラット心筋細胞アポトーシスモデル / Fas ligand / caspase3 / アポトーシス感受性 / clearance rate / 超微形態 |
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| Research Abstract |
マウスのアポトーシスによる劇症肝炎を生ずる投与量(0.5ug/ml)の1倍、4倍、および10倍のsFas ligandを開胸後、左室心筋内に多発性に筋注した。sFas ligandのかわりに生食を投与した群をコントロールとした。投与後、1時間、6時間、24時間および48時間後にsacrificeした(各N=10)。10倍濃度アポトーシス群を新たに作製(N=10)し、caspaseブロッカーを用いてアポトーシスがブロックされるかを検討した。
その結果、1)in vivo成人ラット心筋細胞はFas ligand10倍濃度群でのみアポトーシスが生じ、アポトーシス心筋細胞は24時間後には心筋組織からclearanceされた。すなわち、in vivo心筋細胞のFas ligandに対するアポトーシス感受性は、肝細胞と比較し10倍低くかつ24時間以内に消失する。2)10倍濃度群では心筋組織にcaspase3が活性化され、かつpancaspaseブロッカーBoc-Asp-fmkにより、心筋細胞のアポトーシスはブロックされた。すなわちFas ligandで誘発されるアポトーシスのsignal transductionはcaspase3を介して生ずる。3)in vivo成人心筋細胞アポトーシスの超微形態は、schrinkage,chromatin condensation,アポトーシス小体があるという点では他の細胞のアポトーシスと同様である。しかし、半月形または三ケ月形のchromatin condensationがないことや、ミトコンドリアの変化の点で他の細胞のアポトーシスと著しく異なっている。
以上より、心筋細胞アポトーシスの特徴が、感受性、clearance rateならびに超微形態という観点から明らかにされた。この成績は、今後の循環器アポトーシス研究にきわめて重要な所見を提供している。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Takemura G et al.: "Characterization of ultrastructure and its relation with DNA fragmentaion in Fas-induced apoptosis of cultcned myocytes"J Pathol. 193(4). 546-556 (2001)
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[Publications] Maruyama R et al.: "Dynamic process of apoptosis in adult rat cardiomyocytes analyzed using 48-hour videmomicroseopy and electron microscopy"Am J Pathol. 159(8). 683-691 (2001)
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[Publications] Wada H et al.: "Tumor necrosis factor-α plays a protective role in active viral myocarditis in mice"Circulation. 103(2). 743-749 (2001)
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[Publications] Matsuo H et al.: "Validation of collateral fractional flow recerve by myocardial perfusion Imaging"Circulation. (In press). (2002)
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[Publications] Hayakawa K et al.: "Sensitivity to apoptosis signal,clearance rate and ultrastructure of Fas Ligand-induced apoptosis in in vivo adult cardiac cells"Circulation. (In press). (2002)
