アトピー病因遺伝子群の構造生物学的解明と環境中でのオーダーメイド治療予防への応用

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470163
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 近藤 直実 岐阜大学, 医学部, 教授 (50124714)
• Keywords: アトピー / インターフェロン-γ / インターロイキン12レセプター / IgE / 病因遺伝子 / インターロイキン18レセプター

Research Abstract

平成14年度は、解明されたアトピーの病因遺伝子群の構造生物学的解明と機能異常との関連を解明した。
明らかになった多病因遺伝子群のコードするタンパクとその機能を分析した。すなわち、アレルギーの発症機構を(1)抗原侵入後の抗原提示細胞での抗原プロセッシングおよびHLAクラスII抗原による抗原ペプチド提示(2)抗原提示細胞からのIL-12の産生低下、(3)ヘルパーT細胞による認識後のTh2ヘルパーT細胞の偏った活性化とIL-41、IL-5などのサイトカインの産生亢進、(4)B細胞からのIgE産生亢進、(5)好酸球、好塩基球、肥満細胞の活性化と種々の炎症性メディエーターの産生亢進、(6)標的組織でのアレルギー性炎症の惹起と組織障害の一連の過程と、このうち明らかになった病因遺伝子がコードするタンパクを分子遺伝学的並びに構造生物学的に解析した。上記の(1)〜(6)の一連のアレルギー反応に従って分子遺伝学的並びに構造生物学的に解析を進め、(1)抗原特異的T細胞クローンの樹立と構造生物学:Derf1あるいはβラクトグロブリンに過敏性のある患者からクローンを樹立し、DR抗原を中心にHLA抗原と抗原ペプチドとの結合を核磁気共鳴NMRなどを用いて構造生物学的に解析した。またmutation experimentにより、核となるアミノ酸と塩基配列を決定する。(2)抗原提示細胞からのIL-12遺伝子の発現:IgE産生亢進の理由の1つをIL-12遺伝子発現低下に求め得る可能性があることから、IL-12遺伝子の調節領域およびcoding領域の塩基配列を決定し、その異常を分子遺伝学的及びNMRを用いて構造生物学的に明らかにした。(3)B細胞内におけるIgE遺伝子発現亢進の分子遺伝学的解析:Ig遺伝子の調節領域Iε、Sεおよびcoding領域であるCε、さらにVDJ可変部領域の抗原特異性を見出した。(4)アフキドン酸カスケードに関与している酵素の遺伝子変異を明らかにした。
以上の成績をもとに、次年度はオーダーメイド治療としての臨床応用につき検討する。

Research Products

• [Publications] Kondo, N., Matsui, E., et al.: "Review : Atopy and mutations of II-12 receptor β2 chain gene"Clin Exp Allergy. 31. 1189-1193 (2001)
• [Publications] Terada, T., Kondo, N.et al.: "Analysis of Ig subclass deficiency : First reported case of IgG2, IgG4, and IgA deficiency caused by deletion of C α1, ψCγ, Cγ2, Cγ4, and C ε in a Mongoloid patient"J Allergy Clin Immunol. 108. 602-606 (2001)
• [Publications] Kondo, N., Matsui, E., et al.: "Reduced interferon-gamma production and mutations of the interleukin-12 receptor beta(2) chain gene in atopic subjects"Int Arch Allergy Immunol. 124. 117-120 (2001)
• [Publications] Inoue, R., Kondo, N.et al.: "Identification of beta-lactoglobulin-derived peptides and class II HLA molecules recognized by T cells from patients with milk allergy"Clin Exp Allergy. 31. 1126-1134 (2001)
• [Publications] Sakaguchi, H., Kondo, N.et al.: "Interaction among human leucocyte antigen-peptide-T cell receptor complexes in cow's milk allergy : the significance of human leucocyte antigen and T cell receptor-complementarity determining region 3 loops"Clin Exp Allergy. 32. 762-770 (2002)
• [Publications] Suzuki, K., Kondo, N.et al.: "THE correlation between ovomucoid-derived peptides, human leucocyte antigen class II molecules and T cell receptor-complementarity determining region 3 compositions in patients with egg-white allergy"Clin Exp Allergy. 32. 1223-1230 (2002)
• [Publications] 近藤直実: "IgEクラススイッチ"メディカルレビュー社. 271 (2001)