新規トランスポーターによる抗癌剤の細胞内取り込みの解析:感受性増強のための新戦略

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470231
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 椎葉 健一 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (90196345)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 溝井 賢幸 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (90271949) ; 阿部 高明 東北大学, 医学部附属病院, 講師 (80292209)
• Keywords: トランスポーター / 有機アニオン / 抗癌剤 / 抗癌剤感受性 / 固形癌

Research Abstract

1:ヒト癌細胞株のトランスポーター発現の解析
(1)LST-2のmRNA発現強度をリアルタイムRT-PCRにて検討したところ、肝臓癌、胃癌、大腸癌、乳癌の細胞株において、高い発現が認められた。
2:LST-1またはLST-2遺伝子導入による、抗癌剤取り込みおよび感受性変化の解析
(1)LST-1またはLST-2のcDNAを組み込んだ組み換えadenovirus (AdLST-1、AdLST-2)およびコントロールウイルスAdβ-galを作製した。
(2)乳癌細胞株MB231およびZR75-1にAdLST-1またはAdLST-2を感染させ、LST-1・LST-2が強制発現されることを、Western blot・蛍光免疫染色にて確認した。
(3)MTXの細胞内取り込みを^3H-MTXを用いて測定した。AdLST-1およびAdLST-2感染細胞は、no virus群、Adβ-gal群に比べ、有意に取り込み量が増加した。
(4)癌細胞に対するMTXの作用増強効果について検討した。LST-1・LST-2を強発現させたMB231およびZR75では、MTT assayにてMTXに対する感受性が有意に増加した。またLST-1・LST-2が運ぶ基質のひとつであるBSPにより、その感受性増強効果は抑制された。
(5)MB231細胞をSCID mouse皮下移植1週間後に、AdLST-1、AdLST-2、Adβ-galをそれぞれ腫瘍内注入し、その48時間後よりMTX 2mg/kgを5日間腹腔内連続投与した。MTXを投与せず、adenovirus のみ投与した群では、腫瘍増殖に有意な差は認められなかった。一方AdLST-1/MTX投与群およびAdLST-2/MTX投与群は、MTXのみ投与した群、およびAdβ-gal群と比べ、有意に腫瘍増殖抑制効果がみられた。ZR75-1についても同様の検討をおこなっている。

Research Products

• [Publications] Abe T et al.: "Thyroid hormone transporters : recent advances"Trends Endocrinol Metab. 13・5. 215-220 (2002)
• [Publications] Ito A et al.: "Distribution of organic anion-transporting polypeptide 2 (oatp2) and oatp3 in the rat retina"Investt Ophthalmol Vis Sci. 43・3. 858-863 (2002)
• [Publications] Sato K et al.: "Expression of organic anion transporting polypeptide E (OATP-E) in human placenta"Placenta. 24・2-3. 144-148 (2003)