2003 Fiscal Year Annual Research Report
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13470235
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
貝原 聡 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教授 (70324647)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田畑 泰彦 京都大学, 再生医科学研究所, 教授 (50211371)
上本 伸二 三重大学, 医学研究科, 教授 (40252449)
田中 紘一 京都大学, 医学研究科, 教授 (20115877)
岡本 雅彦 京都府立医科大学, 医学研究科, 講師 (90295650)
吉村 了勇 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (00191643)
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| Keywords | 小腸再生 / 組織工学 / 細胞外マトリックス / マイクロカプセル |
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| Research Abstract |
1.小腸細胞分離・移植に関係した研究
ラット新生児の小腸よりの小腸細胞を分離しPolyglycolic acid (PGA)メッシュに接種後同系のラットに移植し新生小腸を作製した。続いてこの新生小腸の吸収実験をラディオアイソトープ(RI)を用いて行ったところ、正常小腸とほぼ同等の糖吸収能を有することが証明された。またこの度、コラゲナーゼ処理の方法を変えることにより、従来より平均して20%多く細胞塊を採取することが可能となった。
2.細胞外マトリックス支持組織の開発
従来のPGAメッシュには細胞の付着がきわめて不良であった。そこでPGAメッシュを7%ポリ乳酸溶液(PLLA)溶液でコーティングすることによりメッシュの繊維間に膜様構造を作製し、細胞の付着面積を増加させた。しかしPLLAは細胞付着性がきわめて不良なため、PLLA膜を持つPGAポリマーを水酸化ナトリウム処理した上でコラーゲンでさらにコーティングすることにより、小腸細胞塊の付着を向上させる事が可能となった。しかしこのポリマーに小腸細胞塊を接種し同系のラットに移植したところ、細胞塊は生着せず小腸は新生しなかった。そこで移植後1〜3日目にポリマーを採取し組織学的に検討したところ、ほとんどの細胞、特にポリマー内部のものは全て移植後早期に壊死に陥っていることがわかった。つまりポリマー内に膜様構造を作製することにより多くの細胞を移植することが可能となったが、一方で酸素や栄養素の消費量も増え、その結果としてほぼ全ての細胞が壊死に陥ったのではないかと推測された。
3.徐放性カプセルの作製
ゼラチンベースの徐放性カプセルを用いることにより、EGFがある一定の濃度・速度にて持続的に放出されることがわかったが、満足のいく細胞支持組織が完成しなかったためvivoの移植実験には用いることができなかった。
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