膵癌の浸潤転移機構における成長因子/細胞接着因子に関する基盤的研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470254
• Research Institution: KYOTO UNIVERSITY
• Principal Investigator: 土井 隆一郎 京都大学, 医学研究科, 講師 (20301236)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤本 康二 京都大学, 医学研究科, 助手 (70335280) ; 今村 正之 京都大学, 医学研究科, 教授 (00108995)
• Keywords: TGF-β / 上皮間葉系細胞化生 / Smad / カドヘリン

Research Abstract

TGF-βシグナルとRhoB蛋白機能:培養細胞株を用いて,TGF-β刺激により上皮間葉系細胞化生(EMT)が誘導されることを見いだした.また,TGF-β誘導性EMTと浸潤能の関連を見いだした.さらに,TGF-βのRhoGTPasesの発現抑制を蛋白,mRNAレベルで確認し,RhoB蛋白の機能解析として野生型・変異型RhoB発現ベクターを用い,安定発現細胞株を樹立して,EMT誘導能,細胞増殖能,アガロース寒天培地増殖能,遊走・浸潤能について検討した. TGF-β刺激伝達系においては主にSmad系抑制経路とMAPKsカスケード(ERK1/2,JNK/SAPK, p38MAPK)の存在が知られるが,浸潤転移形質獲得のシグナル経路においてMAPKsカスケードが関与していることを示した.膵癌の遺伝子異常と浸潤転移能: K-Ras, DPC4,TGF-βRII遺伝子変異状況の異なる膵癌細胞株を選別し,シグナル分子のK-Ras, DNRasおよびRhoB, MEK1/2,SMAD4のDNとCA formを遺伝子導入した発現安定株を用いて,細胞生物学的実験手法によりTGF-βによる浸潤転移形質獲得機構を検討し,またTGF-β刺激下におけるEMT検索,RhoB蛋白・Cdc42蓄積とカドヘリン発現を検討して,遺伝子異常に遺伝子異常に基づくRas蛋白活性化によるTGF-βシグナリングの変化および浸潤転移能を示した.同時に,膵癌切除標本においてK-Ras, DPC4遺伝子変異を確認するとともに,TGF-βシグナル関連因子・浸潤転移関連因子・間葉系形質の遺伝子・蛋白発現と腫瘍組織内局在を検討し,臨床病理学的進行度との相関について統計学的に解析した結果, cadherin, integtinの癌細胞の浸潤・転移における関与機序を臨床膵癌組織,臨床病理学データ,膵癌細胞株において示した.

Research Products

• [Publications] Masui, T.: "Expression of METH-1 and METH-2 in pancreatic cancer : Relationship with tumor invasion"Clinical Cancer Research. 7. 3437-3443 (2001)
• [Publications] Miyamoto, Y.: "Interleukin-6 inhibits radiation induced apoptosis in pancreatic cancer cells"Anticancer Research. 21. 2449-2456 (2001)
• [Publications] Hosotani, R.: "Trojan p16 peptide suppresses pancreatic cancer growth and prolongs survival in mice"Clinical Cancer Research. 8. 1271-1276 (2002)
• [Publications] Lee, JU.: "Antiproliferative activily induced by the somatostatin analogue, TT-232, in human pancreatic cancer cells"European Journal of Cancer. 38. 1526-1534 (2002)
• [Publications] Masui, T.: "Expression of IL-6 receptor in pancreatic cancer : involvement in VEGE induction"Anticancer Research. 22. 4093-4100 (2002)
• [Publications] Ogawa, M.: "Direct electrophilic radiofluorination of a cyclic RGD peptide for in vivo α v β3 integrin related tumor imaging"Nuclear Medicine and Biology. 30. 1-9 (2003)