網膜神経細胞死における遺伝子の発現プロファイリングと遺伝子治療への応用-DNAチップを用いた研究-

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470364
• Research Institution: Shinshu University
• Principal Investigator: 吉村 長久 信州大学, 医学部, 教授 (70211662)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 渋木 宏人 信州大学, 医学部, 助手 (70313864) ; 太田 浩一 信州大学, 医学部, 講師 (70262730) ; 菊池 孝信 信州大学, 機器分析センター, 助教授 (50177797) ; 黒岩 さち子 信州大学, 医学部・附属病院, 助手 (60313863)
• Keywords: 網膜 / 神経細胞死 / 遺伝子発現 / DNAマイクロチップ

Research Abstract

1)ラット網膜虚血・再灌流障害モデルを作成し、神経網膜よりmRNAを回収、対照群と虚血・再灌流障害群間でのmRNA発現の差異をDNA gene chipを用いて検討した。この結果、以下の4群の遺伝子発現が大きく上昇することが分かった。(a)細胞周期関連遺伝子群 (b)転写因子 (c)分子シャペロン (d)活性酸素消去系遺伝子群。
2)同モデルについて、1)の解析により大きな遺伝子発現変化が認められた遺伝子のいくつかについて、その発現経時変化をreal time PCR法で検討中である。その結果、1)の解析とほぼ一致する結果を得た。
3)上記1)の遺伝子のいくつかについて発現部位。細胞の特定を免疫組織化学的に検討した。1)の4群のうち、細胞周期関連遺伝子群、転写因子遺伝子群、活性酸素遺伝子群は、主にアポトーシスを起こしている細胞あるいは、その近傍の細胞に発現していることが分かった。以上のことより上記1)の遺伝子群がラット網膜虚血・再灌流障害における網膜神経細胞死に大きな役割を果たしていることが明らかとなった。
4)サル高眼圧モデルを作成し、ラットと同様にDNA gene chipによる解析を行っている。現在、予備的なデーターを得ており、次年度以降解析を進行させる予定である。ラットのデーターとサルのデーターを比較検討することにより、網膜神経細胞死に共通のメカニズムを解明できると考えている。