Ahレセプター介在型ダイオキシン毒性の種特異的リスク評価法の開発

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13480170
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 岩田 久人 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 助教授 (10271652)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田辺 信介 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 教授 (60116952)
• Keywords: ダイオキシン / Ahレセプター / 水鳥 / アホウドリ / カワウ

Research Abstract

水棲鳥類であるクロアシアホウドリ(Diomedea nigripes)やカワウ(Phalacrocorax carbo)は2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD)を含むダイオキシン類を高濃度に蓄積している。ダイオキシン類は、aryl hydrocarbon receptor (AHIR)シグナル伝達経路を介して、様々な毒性影響を及ぼす。しかしながら、野生動物AHRの特性や感受性はほとんど明らかにされていない。本研究では、AHR cDNA塩基配列の同定、さらにmRNAの組織別および個体別発現量の解析を試みた。
RT-PCR・RACE法により、クロアシアホウドリとカワウで、それぞれ2種のAHRアイソフォームcDNA塩基配列を同定した。系統学的解析の結果、これらは'AHR1 clade','AHR2 clade'に属していた。これまでAHR2の存在は魚類のみで報告されており、他の脊椎動物でAHR2の存在を確認したのは本研究が最初である。各鳥類のAHR1とAHR2のアミノ酸配列相同性は33-35%であった。この相同性は哺乳類や魚類の同一アイソフォームの相同性より低く、各アイソフォームの種を超えた高い保存性が確認された。
リアルタイムRT-PCR法を用いて、カワウのAHRアイソフォームmRNA量を組織別に解析したところ、AHR1は多くの組織でほぼ同程度に、AHR2は主に肝臓で発現していた。また肝臓中AHR mRNA量の個体別比較から、AHR1とAHR2の発現量の間に有意な関係は認められなかった。また、AHR1 mRNA発現量とTEQ値の間にも有意な関係は認められなかったが、AHR2はTEQ値の上昇に伴い減少した。以上の結果から、各AHRアイソフォームはそれぞれ異なる発現制御を受け、特異的な機能を有していることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Kim, E-Y.: "Searching for novel CYP members using cDNA library from a minke whale"Marine Environmental Research. 発表予定. (2004)
• [Publications] Yasui, T.: "Identification of aryl hydrocarbon receptor 2 in aquatic birds : cDNA clonong of AHR1 and MHR2 and characteristics of their amino acid sequences"Marine Environmental Research. 発表予定. (2004)
• [Publications] Sakai, H.: "Cloning and expression of analysis of constitutive androstane receptor cDNAs in Baikal seal (Phoca sibirica) and northern fur seal (Callorhinus ursinus)"Marine Environmental Research. 発表予定. (2004)