2002 Fiscal Year Annual Research Report

マンソン住血吸虫における全BACクローンの染色体マップの完成

Research Project

Project/Area Number	13557021
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	平井啓久京都大学, 霊長類研究所, 助教授 (10128308)
Keywords	マンソン住血吸虫 / ゲノムプロジェクト / BACクローン / 染色体マッピング / 染色体彩色プローブ / 染色体顕微切断法
Research Abstract	BACクローンのマッピングは前年度に引き続き継続中である。現在までのところ、染色体上にマップできたクローンは合計250個である。より迅速にマップする方法を改良する必要を感じている。今年度から染色体彩色プローブの作製に取りかかった。以下の手技を開発した。(1)ガラスキャピラリーを用いて、先端口径直径2μ以下のガラスナイフを作製。(2)染色体標本は26X40cm^2のカバーガラス上に作製(3)4%ギムザ染色液で1分染色後乾燥した標本を倒立顕微鏡に設置し、マイクロマニピュレーターに取り付けたガラスナイフで各染色体を削り取る。(4)削り取った染色体断片はガラスナイフの先端と共に滅菌した0.5mlチューブに入れ保存する。(5)各染色体の断片が5〜10本になったところで、プロティナーゼを用いて染色体の蛋白質を融解する。(6)その後、普遍的プライマーを用いて、染色体DNAのPCR増幅を行う。(7)PCR産物をPCRを用いて蛍光色素標識し、蛍光イン〓ツーハイブリダイゼーション(FISH)によって、その産物の染色体上の位置を確認する。(8)特異的な〓在位置を示す産物は、pGMT-Tベクターを用いてクローニングする。非特異的な局在性を示す産物は、ゲノムDNAあるいは反復配列Smaを用いて非特異的反復配列を除去後、クローニングを行う。現在、この手技を用いて各染色体の彩色プローブを作製中である。彩色プローブは各染色体を明確に同〓するのに有効である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Hirai, H., et al.: "Cytogenetic differentiation of two synpatric tree shrew taxa found in the southern part of the Isthmus of Kra"Chromosome Research. 10/4. 313-327 (2002)
[Publications] Go, Y., et al.: "Mhc-DRB genes evolution in lemurs"Immunogenetics. 54/6. 403-417 (2002)
[Publications] Foulk, B.W., et al.: "Adenylosuccinate lyase of Schistosoma mansoni : gene structure, mRNA expression, and analysis of the predicted peptide structure of a potential chemotherapeutic target"International Journal for Parasitology. 32/. 1487-1495 (2002)
[Publications] Hirai, H., et al.: "Genetic mechanisma and property of a whole-arm transloction (WAT) between chromosomes 8 and 9 agile gibbons (Hylobates agiis)"Chromosome Research. 11/1. 37-50 (2003)
[Publications] Taguchi, T., et al.: "A useful probe for analyzing Y chromosome evolution of the Old World monkey generated by chromosome microdissection"Chromosome Research. (in press). (2003)
[Publications] Iwase, M., et al.: "Differentiation of sex chromosomal amelogenin genes in primates and other mammals"Proc.Nati.Acad.Sci. USA. (in press). (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

マンソン住血吸虫における全BACクローンの染色体マップの完成

Principal Investigator

平井 啓久 京都大学, 霊長類研究所, 助教授 (10128308)

Research Products

[Publications] Hirai, H., et al.: "Cytogenetic differentiation of two synpatric tree shrew taxa found in the southern part of the Isthmus of Kra"Chromosome Research. 10/4. 313-327 (2002)

[Publications] Go, Y., et al.: "Mhc-DRB genes evolution in lemurs"Immunogenetics. 54/6. 403-417 (2002)

[Publications] Foulk, B.W., et al.: "Adenylosuccinate lyase of Schistosoma mansoni : gene structure, mRNA expression, and analysis of the predicted peptide structure of a potential chemotherapeutic target"International Journal for Parasitology. 32/. 1487-1495 (2002)

[Publications] Hirai, H., et al.: "Genetic mechanisma and property of a whole-arm transloction (WAT) between chromosomes 8 and 9 agile gibbons (Hylobates agiis)"Chromosome Research. 11/1. 37-50 (2003)

[Publications] Taguchi, T., et al.: "A useful probe for analyzing Y chromosome evolution of the Old World monkey generated by chromosome microdissection"Chromosome Research. (in press). (2003)

[Publications] Iwase, M., et al.: "Differentiation of sex chromosomal amelogenin genes in primates and other mammals"Proc.Nati.Acad.Sci. USA. (in press). (2003)

平井啓久京都大学, 霊長類研究所, 助教授 (10128308)