2002 Fiscal Year Annual Research Report

天疱瘡モデルマウスを用いたB細胞の組織特異的抗原に対する自己寛容獲得機構の解明

Research Project

Project/Area Number	13557026
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) 西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
Keywords	自己寛容 / B細胞 / 自己免疫疾患 / 天疱瘡 / ノックアウトマウス / 自己抗体
Research Abstract	本研究は、自己反応性の細胞が存在するにもかかわらず末梢の抗原に対する自己寛容がどのように維持されるかを明らかにすることを目的として行われた。特にB細胞において末梢の抗原に対する自己寛容がどのようにして成立するかを明らかにすることを量重要課題とした。この目的のために、我々はこれまでに作製してきた尋常性天庖瘡モデルマウスを利用した。すなわち尋常性天庖瘡の抗原であるデスモグレイン3(DSG3)のKOマウスにリコンビナントDSG3を免疫し,そのマウスの脾臓細胞をrag-2KOマウス(T細胞やB細胞を持たない免疫不全マウスであるがDSG3は発現する)に移植し,自己抗体(抗DSG3抗体)の生産を持続的に行うしマウスを作製した。このモデルマウスの脾臓細胞とミエローマ細胞の細胞融合を行うことによってハイブリドーマを作製し、抗マウスDSG3抗体を生産するハイプリドーマを選別した。その中の一つのハイブリドーマが分泌する抗体のH鎖とL鎖の両方の可変領域のcDNAを得、この可変領域を持つ抗体を生産するトランスジェニックマウスを作製した。作製されたトランスジェニックマウスにおいては、抗DSG3抗体を発現するB細胞は骨髄においても末梢においても検出され、除去されている証拠は得られなかった。これらの事実は抗DSG3抗体を発現するB細胞がいわゆるネガティプセレクションの対象となって除去されていないことを示す。今後は、このマウスを用い、除去されていない自己反応性の細胞がどのようにして活性化されるのか、換言すれば自己寛容の破綻がどのようにして起こるのかを明らかにすることを目指す予定である。本研究の成果は自己免疫疾患の発症機序の理解に大きく貢献すると期待され、その応用範囲も広くさらに将来的には自己免疫疾患の治療法の開発にも貢献する意義深いものであると信じている。

Research Products

(12 results)

All Other

All Publications (12 results)

[Publications] Ohyama, M., et al.: "Suppression of the immune response against exogenous desmoglein 3 in desmoglein 3 knockout mice: an implication for gene therapy"J. Invest. Dermatol.. (in press). (2003)
[Publications] Suzuki, H., et al.: "P13K and Btk differentially regulate B cell antigen receptor mediated signal transduction"Nat. Immunol.. 4. 280-286 (2003)
[Publications] Tsunoda, K., et al.: "Induction of pemphigus phenotype by a mouse monoclonal antibody against the amino-terminal adhesive interface of desmoglein 3"J. Immunol.. 170. 2170-2178 (2003)
[Publications] Shimizu, A., et al.: "The ultrastructureal changes of mice actively producing antibodies to desmoglein 3 parallel those in patients with pemphigus vulgaris"Arch. Dermatol. Res.. 294. 318-323 (2002)
[Publications] Fukao, T., et al.: "P13K-mediated negative feedback regulation of IL-12 production in dendritic cells"Nat. Immunol.. 3. 875-881 (2002)
[Publications] Agematsu, K., et al.: "Absence of memory B cells in patients with common variable immunodeficiency"Clin. Immunol.. 103. 34-42 (2002)
[Publications] Fukao, T., et al.: "Selective loss of gastrointestinal mast cells and impaired immunity in P13K-deficient mice"Nat. Immunol.. 3. 295-304 (2002)
[Publications] Tsunoda, K., et al.: "Pathogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur. J. Immunol.. 32. 627-633 (2002)
[Publications] Ohteki, T., et al.: "Immunological and histopathological characterization of active disease mouse model for pemphigus vulgaris"Nat. Immunol.. 2. 1138-1143 (2001)
[Publications] Suzue, K., et al.: "Critical role of NK but not NKT cells in acute rejection of parental bone marrow cells in F1 hybrid mice"Eur. J. Immunol.. 31. 3147-3152 (2001)
[Publications] Ohiteki, T., et al.: "Overexpression of bcl-2 differentially restores development of thymus-derived CD4-8+ T cells and intestinal intraepithelial T cells in IRF-1 deficient mice"J. Immunol.. 166. 6509-6513 (2001)
[Publications] Fukao, T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses"J. Immunol.. 166. 4446-4455 (2001)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

天疱瘡モデルマウスを用いたB細胞の組織特異的抗原に対する自己寛容獲得機構の解明

Principal Investigator

小安 重夫 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)

Research Products

[Publications] Ohyama, M., et al.: "Suppression of the immune response against exogenous desmoglein 3 in desmoglein 3 knockout mice: an implication for gene therapy"J. Invest. Dermatol.. (in press). (2003)

[Publications] Suzuki, H., et al.: "P13K and Btk differentially regulate B cell antigen receptor mediated signal transduction"Nat. Immunol.. 4. 280-286 (2003)

[Publications] Tsunoda, K., et al.: "Induction of pemphigus phenotype by a mouse monoclonal antibody against the amino-terminal adhesive interface of desmoglein 3"J. Immunol.. 170. 2170-2178 (2003)

[Publications] Shimizu, A., et al.: "The ultrastructureal changes of mice actively producing antibodies to desmoglein 3 parallel those in patients with pemphigus vulgaris"Arch. Dermatol. Res.. 294. 318-323 (2002)

[Publications] Fukao, T., et al.: "P13K-mediated negative feedback regulation of IL-12 production in dendritic cells"Nat. Immunol.. 3. 875-881 (2002)

[Publications] Agematsu, K., et al.: "Absence of memory B cells in patients with common variable immunodeficiency"Clin. Immunol.. 103. 34-42 (2002)

[Publications] Fukao, T., et al.: "Selective loss of gastrointestinal mast cells and impaired immunity in P13K-deficient mice"Nat. Immunol.. 3. 295-304 (2002)

[Publications] Tsunoda, K., et al.: "Pathogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur. J. Immunol.. 32. 627-633 (2002)

[Publications] Ohteki, T., et al.: "Immunological and histopathological characterization of active disease mouse model for pemphigus vulgaris"Nat. Immunol.. 2. 1138-1143 (2001)

[Publications] Suzue, K., et al.: "Critical role of NK but not NKT cells in acute rejection of parental bone marrow cells in F1 hybrid mice"Eur. J. Immunol.. 31. 3147-3152 (2001)

[Publications] Ohiteki, T., et al.: "Overexpression of bcl-2 differentially restores development of thymus-derived CD4-8+ T cells and intestinal intraepithelial T cells in IRF-1 deficient mice"J. Immunol.. 166. 6509-6513 (2001)

[Publications] Fukao, T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses"J. Immunol.. 166. 4446-4455 (2001)

小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)