臓器非特異的多目的がんスクリーニングのための尿中3HYP含有ペプチド測定法の開発

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13557034
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 岡崎 勲 東海大学, 医学部, 教授 (00051649)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 渡辺 哲 東海大学, 医学部, 助教授 (10129744) ; 林 利彦 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 教授 (60090528) ; 松山 重雄 防衛医科大学校, 共同利用研究施設, 講師 ; 古屋 博行 東海大学, 医学部, 講師 (10276793)
• Keywords: がん検診 / スクリーニング検査 / 基底膜 / 尿3-ハイドロキシプロリン / ELISAキット / 地域保健

Research Abstract

老人保健法に基づいて地域のがん検診が行われているが、一般財源化により市町村は経費がかからず、それでいて質的に高い検診システムを求めている。がんの種類を問わず、がんの増殖・浸潤・転移に際し、基底膜は破壊される。基底膜の中核はIV型コラーゲンであり、IV型コラーゲンに特異的アミノ酸である3-Hydroxyprolineが、がん患者で有意に高値を示し、がん検診に使用できる根拠を私どもは示した(Okazaki I, et al. : J Lab. Clin. Mrd., 120 : 908-920, 1992)。がん検診としての本検査方法のROC分析は、スクリーニング検査として有用な検査方法であることを示した(Bos AJG, Okazaki I, et al.: Jpn.J.Hyg., 49 : 797-806)。
平成13年度および平成14年度で科学研究費補助金を得て、行った結果は以下の通りである。
1.尿中のIV型コラーゲン由来3-Hydroxyproline含有ペプチド測定のためのELISAによる測定キットの開発
6つのペプチドを合成し、これを用いて家兎に抗体を産生させた。Cys-(3Hyp-4Hyp-Gly)3, Cys-(Pro-4-Hyp-Gly)3, Boc-t-3-L-Hyp(Bzl), Gly-L-3Hyp-L-4Hyp, L-4Hyp-Gly-L-3Hyp, L-3Hyp-L-4Hyp-Gly。第1ペプチドを抗原とする抗体のうち、第2ペプチド抗原に対する抗体を除いて、ポリクローナルで3つの抗体を作成することが出来た。さらに、この抗体を用いてELISAによる測定キットを作成することが出来た。なお、第3、4、5および第6ペプチドは第1と第2ペプチドの作成に必要なペプチドとして合成された。
2.Informed Consentを得て、尿3HYPを測定した199人の海老名市基本検診受診者の成績
海老名市医師会、海老名市保健予防課および私どもとの多年に亘る共同研究で、市民の人達の理解と検体採取に際しては、東海大学医の倫理委員会で許可された書式のInformed Consentに署名を受け、結果の問い合わせに対し、カウンセルを行うサービスを設けて、199人の尿を分析することが出来た。岡崎、松山らが1992年の原著で報告したアミノ酸自動分析機を用いる方法、最近某社で開発してくれたHPLCによる測定、上記ELISAによるキットで測定した測定値の3者について相関を求め検討した。199人のうち、3人で高値が見られ、これについてはHPLCによる測定は振り切れて、異常高値を示した。その他の196人の尿3HYP値は3者で相関が見られ、男女別、年齢層別の正常値が明らかに出来た。
3.膵癌などの患者の尿3HYP値の検討
Informed Consentを得て採取された10人のがん患者の尿3HYP値は3例で異常に高値で、3者の測定方法で,HPLCは振り切れ、ELISAキットによる測定が良い結果を示した。

Research Products

• [Publications] 古屋博行, 伊藤 俊, 岡崎 勳: "肺がん"医学と疫学. 48(2). 171-177 (2002)
• [Publications] Watanaba T, et al.: "Neural stem/progenitor cells appear in the recovery from liver fibrosis"Hepatology. 36(4). 248-248 (2002)
• [Publications] Inagaki Y, et al.: "Interferon α antagonizes transforming growth factor β-stimulated collagen gene transcription and suppresses promoter activation"Hepatology. 36(4). 247-247 (2002)
• [Publications] 岡崎 勳, 新岡 真希: "消化器ナビゲーター (滝川 一 編)"細胞外マトリックス. 2 (2002)