慢性関節リウマチの抑制性自己抗原:その遺伝子改変動物の作製と誘導関節炎の病態解析

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13557041
• Research Institution: St. Marianna University School of Medicine
• Principal Investigator: 尾崎 承一 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (00231233)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 杉野 弘 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (50211305) ; 小川 佳宏 京都大学, 医学研究科, 助手 (70291424) ; 田中 真生 京都大学, 医学研究科, 助手 (10332719) ; 大本 安一 大塚製薬, 医薬第一研究所, 主任研究員 ; 吉崎 和幸 大阪大学, 健康保健体育部, 教授 (90144485)
• Keywords: 慢性関節リウマチ / ホリスタチン関連蛋白 / FRP / gp130-RAPS / コラーゲン誘導関節炎 / DBA / 1マウス / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス

Research Abstract

申請者が慢性関節リウマチ(RA)患者滑膜cDNAライブラリーからクローニングしたホリスタチン関連蛋白(FRP)と新規可溶型gp130-RAPSはRA滑膜細胞の機能や増殖を抑制し、自己抗体はそれらの作用を相殺する。本研究ではRA関節炎におけるFRPとgp130-RAPSの作用を明らかにするため、ヒトRA類似の関節炎であるコラーゲン誘導関節炎の好発系DBA/1マウスを用いて、FRPおよびgp130-RAPSを関節内で過剰発現するトランスジェニックマウスおよびFRPノックアウトマウスを作製し、これらの遺伝子改変DBA/1マウスで誘導された関節炎の性状を野生型マウスと比較検討することを目的とする。まず本年度は、FRPトランスジーンを持つfounderマウスを数匹選定し、DBA/1マウスへの退交配を開始した。あわせて、FRPの関節炎に及ぼす影響を検定するために、II型コラーゲンに対するモノクローナル抗体カクテルによるマウス関節炎モデルに対して精製リコンビナントFRPを投与した。その結果、投与マウスにおいて関節炎の発症と病態の抑制が観察された。これは関節炎におけるFRPの治療効果を示唆する最初の成績であり、投与マウスの匹数とコントロールマウスを増やして検討中である。その他、本研究ではFRPノックアウトDBA/1マウスおよびgp130-RAPSトランスジェニックDBA/1マウスの開発と系統維持を計画しており、本年度はその準備段階として、マウスFRP遺伝子のペプチド翻訳領域を破壊したターゲッティングベクターの作成(杉野分担研究者)、および、ヒトgp130-RAPSの全長と同一サイズとなるようにサイトカインコンセンサス(WSDWS)より16アミノ酸C末端側で切れたものに相当するマウスgp130のcDNA(1-1069)の調整(吉崎分担研究者)に着手している。

Research Products

• [Publications] Ochiai K., Ozaki S., et al.: "Genetic regulation of anti-erythrocyte autoantibodies and splenomegaly in autoimmune hemolytic anemia-prone New Zealand Black mice"Int. Immunol.. 12・1. 1-8 (2000)
• [Publications] Tanaka M., Ozaki S., et al.: "Cloning of novel soluble gp130 and detection of its neutralizing auto-antibodies in rheumatoid arthiritis"J. Clin. Invest.. 106・1. 137-144 (2000)
• [Publications] Ma W., Ozaki S., et al.: "Detection of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in MRL/Mp-lpr/lpr mice and analysis of their target antigens"Autoimmunity. 32. 282-291 (2000)
• [Publications] Yahata K., Ozaki S., et al.: "Molecular cloning and expression of a novel klotho-related protein"J. Mol. Med.. 78. 389-394 (2000)
• [Publications] Okazaki T., Ozaki S., et al.: "Antigen-specific Th1 cell as direct effectors of Propionibacterium acnes-primed lipopolysaccharide-induced hepatic injury"Int. Immunol.. 13・5. 607-613 (2001)
• [Publications] 尾崎承一: "血管炎症候群の診断と病態把握:免疫血清学的検査。「血管炎」"朝倉書店(東京)長澤俊彦監修・橋本博史編集. (2001)