星細胞制御による肝微小循環調節―NACの肝不全対策への応用と展開

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13557100
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 嶌原 康行 京都大学, 医学研究科, 助教授 (30196498)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 成尚 京都大学, 医学研究科, 助手 (30253298) ; 山岡 義生 京都大学, 医学研究科, 教授 (90089102) ; 河田 則文 大阪市立大学, 医学部, 助手 (30271191) ; 寺嶋 宏明 京都大学, 医学研究科, 助手 (40314215)
• Keywords: 肝微小循環 / 星細胞 / 類洞 / 生体顕微鏡 / 肝障害 / 肝線維化 / 虚血再潅流障害 / 肝不全

Research Abstract

星細胞の活性化が収縮能・弛緩能と深く関わっている事を基に、肝微小循環(類洞血行)の調節を通じて、肝細胞機能へ影響を調べた。星細胞の活性化制御に関連する種々の物質で、抗酸化剤NAC(N-acetyl-L-cisteine)が強力な活性抑制作用を持つことを、ラットTAA-induced肝硬変と胆管結紮の二つの肝線維化モデルにおいて明らかにした。また、星細胞活性化制御の新しい機序の薬剤としてROCK/Rho kinase inhibitorであるY27632が注目されるに到ったので、本物質の効果を検討した。肝臓外科病態に関する急性侵襲モデルとして、ラットで肝虚血再潅流障害を惹起すべく、片葉阻血モデルを確立した。また、慢性肝障害モデルとして、TAAによる肝硬変を作成した。両者について生体顕微鏡を用いた肝微小循環を親察し、Y27632の効果を検討した。ラット肝潅流実験では、エンドテリンによる門脈圧上昇をY27632が有意に抑制することが判明した。また、生体顕微鏡によるラット肝の検討では、90分の片葉虚血を行い再潅流後2時間までを観察した。虚血により、中心静脈径の狭小化、類洞径の狭小化、類洞潅流率の低下、類洞白血球stickingの増加、中心静脈における白血球膠着の増加が見られ、いわゆる肝微小循環が障害されることが判明したが、Y27632投与するとこれらの変化は最小限に抑制され、肝微小循環の改善に著しい効果があることが判明した。障害肝での検討、Y27632の至適濃度、投与方法の検討、NACでの検討、などは現在進行中である。また、Y27632のこれらの効果の機序も星細胞、内皮細胞、白血球への影響などの観点から検討中である。
なお、real timeの肝微小循環の観察に「cytoscan」を導入し、大動物及び臨床肝切除術へ応用することになっていたが、当機器製造会社が倒産し供給が不可能になったことが当補助金の交付決定後に明らかとなり、本機器を用いた当初の研究は断念し、従来の生体顕微鏡観察を発展させた研究に力を注いだ。

Research Products

• [Publications] Shimahara-Y: "Significance of serum type IV collagen level of hepatectomized patients with chronic liver damage"World-J-Surg. (印刷中).
• [Publications] Uyama-N: "Regulation of Cultured Rat Hepatocyte Proliferation by Stellate Cells"Journal of Hepatology. (印刷中).
• [Publications] 宇山直樹: "星細胞による肝細胞増殖制御"炎症再生学会雑誌. (印刷中).
• [Publications] Okuyama-H: "Regulation of cell growth by redo-mediated extracellular proteolysis of platelet-derived growth factor receptor beta"J Biol Chem. 276(30). 28274-28280 (2001)
• [Publications] Okuyama-H: "N-acetyl cysteine inhibits PDGF-dependent proliferation of primary cultured o rat hepatic stellate cells through degradation of PDGF receptor and attenuates progress of liver fibrosis in rat models"Cells of Hepatic Sinusoid. 8. 274-276 (2001)
• [Publications] Uyama-N: "The interaction between hepatocytes and stellate cells on individual cell proliferation and differentiation"Cells of Hepatic Sinusoid. 8. 51-54 (2001)