2001 Fiscal Year Annual Research Report

ヌクレオソーム構造修飾によるストレス応答増強法の開発に関する研究

Research Project

Project/Area Number	13557105
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	山本雄造京都大学, 医学研究科, 講師 (70281730)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	寺嶋宏明京都大学, 医学研究科, 助手 (40314215) 山岡義生京都大学, 医学研究科, 教授 (90089102)
Keywords	ストレス応答 / HDAC / 遺伝子導入 / 遺伝子発現 / HSP / Trichostatin A / FR901228 / CHAP31
Research Abstract	HDACIによる内因性のストレス蛋白質発現増強の検討に先立ち、導入された外来性遺伝子の発現をhist one deacetylase inhibitor(HDACI)が増強させることが可能であるか否かを検討した。古典的なHDACIであるTrichostatin A(TSA)はSigma社より購入した。新規HDACI, FR901228とCHAP31は藤沢製薬と東京大学より供与して頂き使用した。 Rat2 fibroblastに大腸菌由来beta galactosidaseをアデノウイルス(AdLacZ)による遺伝子導入法にて発現させ、これに種々のHDACIを併用することでbeta galactosidaseの発現が増強されるかを検討したところ、FR901228は4ng/ml、CHAP31は32ng/mlの濃度にて発現を約10倍に増強させることに成功した。TSAの場合、発現効率上昇の効果がみられる濃度よりも低濃度で細胞に対する毒性の方が強く現れ、増強効果は著明ではなかった。CHAP31に関してはアデノウイルスによる遺伝子発現を増強させうるという報告は過去になく、新しい知見である。FR901228、CHAP31による発現効率上昇効果はbeta galactosidaseのようなレポーター遺伝子のみならず、熱ショック蛋白のような機能を持った遺伝子の場合についても当てはまる事を確認した。マウスを用いたin vivoの系に於いても現在検討中であり、AdLacZを感染させた際の肝臓におけるbeta galactosidaseの発現が、CHAP31を併用する事により増強可能であることの感触を得ている。次に、内因性の遺伝子発現増強効果の有無について検討した。Rat2 fibroblastに熱ショックを与えたときのHSP72の発現を、HDACIが増強させうるか否かをWestern blot法にて検討したところ、熱ショック刺激が軽度の場合には効果が見られそうであるとの感触を得ているが、さらなる検討が必要である。平成14年度にはLPS刺激を与えた際の内因性のIL-6発現などの系を用いて検討する予定である。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yamamoto Y: "In situ pedicle resection in left trisegmentectomy of the liver combined with resection of the right hepatic vein to an inferior vena caval segment transpositioned from the infra hepatic portion"J Am Coll Surg. 192(1). 137-141 (2001)
[Publications] Yokata S: "Increased expression of cytosolic chaperonin CCT in human hepatocellular carcinoma"Cell Stress Chaperones. 6(4). 345-350 (2001)
[Publications] Yonezawa K: "Suppression of TNF-alpha production and neutrophil infiltration during ischemia-reperfusion injury of the liver after heat shock preconditioning"J Hepatol. 35. 619-627 (2001)
[Publications] Uchinami H: "Effect of Heat Shock Preconditioning on NF-kB/I-kB pathway during Ischemia-Reperfusion Injury of the Rat Liver"Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. (in press). (2002)
[Publications] Takeda T: "Heat shock restores insulin secretion after injury by nitric oxide by maintaining glucokinase activity in rat islets"Biochem Biophys Res Commun. 284. 20-25 (2001)
[Publications] Yamamoto Y: "Leberresektion bei Lebercirrhose"Chirurg. 72. 784-793 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

ヌクレオソーム構造修飾によるストレス応答増強法の開発に関する研究

Principal Investigator

山本 雄造 京都大学, 医学研究科, 講師 (70281730)

Research Products

[Publications] Yamamoto Y: "In situ pedicle resection in left trisegmentectomy of the liver combined with resection of the right hepatic vein to an inferior vena caval segment transpositioned from the infra hepatic portion"J Am Coll Surg. 192(1). 137-141 (2001)

[Publications] Yokata S: "Increased expression of cytosolic chaperonin CCT in human hepatocellular carcinoma"Cell Stress Chaperones. 6(4). 345-350 (2001)

[Publications] Yonezawa K: "Suppression of TNF-alpha production and neutrophil infiltration during ischemia-reperfusion injury of the liver after heat shock preconditioning"J Hepatol. 35. 619-627 (2001)

[Publications] Uchinami H: "Effect of Heat Shock Preconditioning on NF-kB/I-kB pathway during Ischemia-Reperfusion Injury of the Rat Liver"Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. (in press). (2002)

[Publications] Takeda T: "Heat shock restores insulin secretion after injury by nitric oxide by maintaining glucokinase activity in rat islets"Biochem Biophys Res Commun. 284. 20-25 (2001)

[Publications] Yamamoto Y: "Leberresektion bei Lebercirrhose"Chirurg. 72. 784-793 (2001)

山本雄造京都大学, 医学研究科, 講師 (70281730)