セルロース糖化をめざしたセルラーゼ・キシラナーゼ遺伝子の誘導制御機構の解明

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13650851
• Research Institution: Nagaoka University of Technology
• Principal Investigator: 森川 康 長岡技術科学大学, 工学部, 教授 (50239638)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小笠原 渉 長岡技術科学大学, 工学部, 助手 (40292172) ; 岡田 宏文 長岡技術科学大学, 工学部, 助教授 (70233343)
• Keywords: セルラーゼ / キシラナーゼ / 誘導 / プロモーター / xyn3 / eg13 / Trichoderma reesei / 転写活性化因子

Research Abstract

T.reeseiのセルラーゼ・キシラナーゼ群遺伝子の誘導発現の調節機構解明を目指して、まずキシラナーゼIII遺伝子(xyn3)のプロモーター領域の塩基配列の解析を行った。xyn3を発現するT.reeseiPC-3-7株と、その親株であり同じ遺伝子を持っているもののxyn3を発現しないQM9414株の両xyn3遺伝子をクローニングしそのプロモーター領域の塩基配列を比較したところ、ごく一部の未決定の領域(約80bpで、ここにセルラーゼ遺伝子の転写活性化因子ACEIの結合領域が含まれている)を除いて全く同じ配列であった。未決定部分が同じ配列である場合は両株でACEIあるいはACEIIなどの制御因子の変異の可能性があり、この部分が異なっている場合はACEIが結合出来ないためではないかと想定される。次にエンドグルカナーゼIII遺伝子(egl3)のプロモーター領域約3.4kbpのクローニングを行い、現在塩基配列を決定中である。また、amdSをマーカーとしたT.reesei形質転換系を確立した。これらの結果から、来年度、xyn3およびegl3のプロモーター領域にリポーター遺伝子を結合させ、インデューサーとしてL-ソルボースおよびソホロースを用いたインビボでのプロモーター領域の部分削除実験とともに、バンドシフトアッセイによるインビトロにおける誘導制御蛋白質とプロモーター領域との相互作用の検討を予定している。

Research Products

• [Publications] Masahiro Nogawa et al.: "L-Sorbose induces cellulase gene transcription in the cellulolytic fungus Trichoderma reesei"Current Genetics. 38. 329-334 (2001)
• [Publications] (共著)(財)バイオインダストリー協会編: "発酵ハンドブック"共立出版(株). 680 (2001)