2002 Fiscal Year Annual Research Report
ウシ卵巣での血管作動性腸管収縮ペプチド/エンドセリン2の生理的・病因的役割の解明
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13660308
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
打出 毅 北里大学, 獣医畜産学部, 講師 (20327456)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
天間 恭介 北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (50050654)
斉田 要 産業技術総合研究所, 分子細胞, 主任研究官
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| Keywords | ウシ / エンドセリン2 / 血管作動性腸管収縮ペプチド / クローニング / 卵巣 |
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| Research Abstract |
血管作動性腸管収縮ペプチド(VIC)はエンドセリン(ET)ファミリーに属するペプチドであり、ヒトやイヌのET-2に対応するペプチドと考えられている。我々は、ET-2およびVICの生理学的役割をマウスを実験モデルとして検討してきた結果、卵巣機能と密接な関係がある事を示した。そこで、本研究では、このマウスにおけるVICの基礎研究を基にし、ウシ卵巣におけET-2/VICの役割の解明を試みる。牛では、卵巣疾患に由来する繁殖障害が多く見られ、ウシの卵巣を題材とすることは獣医学上意義が大きい。
本年度は昨年度の研究成果を基に、ウシET-2遺伝子の臓器における発現解析を中心に行った。
1)クローニングで得られた全長cDNAの塩基配列情報を基にしてprimerを設計し、ウシの臓器(心、肺、肝、腎、脾、弟1胃、弟4胃、12指腸、結腸、子宮、卵巣)におけるET2mRNAの発現解析をRT-PCRによって行ったところ、脾臓以外の臓器で発現が確認された。
2)ウシET-2mRNAの定量法の検討をReal time RT-PCR法により行った。増幅効率およびdynamic rangeを指標にPrimerやTaqMan Probeの設計を行い、増幅効率80%以上、dynamic range 10^6以上のsystemが得られた。現在このsystemを用いて臓器におけるウシET-2mRNAの定量解析を行っている。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Tsuyoshi Uchide: "cDNA and deduced amino acid sequences of ferret preproendothelin-2 and phylogenetic analysis"DNA Sequence. 13. 369-374 (2002)
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[Publications] Tsuyoshi Uchide: "Expression of endothelin-1 and vasoactive intestinal contractor genes in mouse organs during the perinatal period"Clin. Sci.. 103. 167S-170 (2002)
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[Publications] Tsuyoshi Uchide: "Endothelin-1 in smooth muscle and mast cells of mouse uterus after parturition"J. Mol. Endocrinol. 27. 165-173 (2001)
