新規構成型熱ショックタンパク質54の分子薬理学的機能解析と核外移行配列の単離同定

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670099
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 塚原 富士子 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (40119996)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉岡 俊正 東京女子医科大学, 医学部, 助教授 (60146438)
• Keywords: heat shock cognate protein 54 / heat shock cognate protein 70 / 核外移行シグナル / CRMI / leptomycinB / 熱ショックタンパク質 / 分子シャペロン / 細胞内局在

Research Abstract

構成型熱ショックタンパク質70(HSC70)は、分子シャペロンとしてペプチドのフォールディング、種々のストレスによって変性したタンパク質の品質管理、タンパク質の細胞内輸送に関わることによって、細胞機能の調節に重要な働きを持つ。我々は、最近ヒトHSC70新規アイソフォーム、HSC54を単離し、その発現、シャペロン活性阻害作用(in vitro)などについて明らかにした(Tsukahara et al., Mol. Pharmacol. 58,1257-1263,2000)。さらにHSC54-green fluorescent protein(GFP)融合タンパク質を細胞内で発現させその局在を観察した結果、HSC54は、HSC70とは異なり、主として細胞質のみに局在し、また熱ストレス後の核内移行も認められなかった。従って、HSC54は核内移行に必要な領域を持たないか、あるいは核外移行配列を持つことが示唆された。そこで本研究では、多数のGFP-HSC70deletion mutant融合蛋白質を作製し、その細胞内局在を検討した。その結果、HSC70の核内移行に必要な領域と核外移行シグナル(NES)のコンセンサス配列に相同性の高い配列を単離した。また、HSC54は、NES受容体CRM1の阻害薬であるleptomycinB存在下では、核内にも局在することを明らかにした。以上の結果から、HSC54は、CRM1と相互作用して核外に移行するNESを持つが、核内移行に必要なタンパク質と相互作用する領域を欠くことから、細胞質のみに局在し、核内へ移行できないことが示唆された。

Research Products

• [Publications] 多胡克哉: "グルココルチコイド受容体(GR)の核-細胞質間移行における熱ショック蛋白質(HSP)の役割"日本内分泌学雑誌. 77巻1号. 184 (2001)
• [Publications] Fujiko Tsukahara: "Nuclear heat shock protein 90 (hsp90) negatively regulates nuclear export of dioxin receptor (AhR)"Jpn.J.Pharmacol.. 88・Suppl I. 275 (2002)
• [Publications] Katsuya Tago: "Interaction between glucocorticoid and heat shock protein 90 inhibitor on activated NF-κB and AP-1"Jpn.J.Pharmacol.. 88・Suppl I. 275 (2002)
• [Publications] Michiko Mori: "Suppressive effect of 17β-estradiol on monocytoid cell adhesion to vascular endothelial cells is mediated by estrogen receptor-α or-β"Jpn.J.Pharmacol.. 88・Suppl I. 221 (2002)
• [Publications] Fujiko Tsukahara: "Regulation of nucleocytoplasmic shuttling and turnover of dioxin receptor (AhR) by nuclear heat shock protein 90"The Pharmacologist. 44(In press). (2002)