造血細胞における小Maf群転写因子の機能的貢献

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670112
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 本橋 ほづみ 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (00282351)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 雅之 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (50166823)
• Keywords: 小Maf群因子 / 巨核球 / トランスジェニックマウス / 胞体突起形成 / 転写制御 / サブトラクション

Research Abstract

血小板形成における小Maf群因子の機能を明らかにするために,以下の実験を行った.
(1)小Maf群因子の下流で機能する血小板形成機構を担う分子の同定.巨核球からの胞体突起形成に異常が認められる小Maf群因子欠損マウスの巨核球と,野生型巨核球の間で発現に差がある遺伝子を明らかにするために,サブトラクション法を行った.その結果,アクチンや,チュブリンなどの細胞骨格に関係した遺伝子が,変異巨核球において減少していた.また,新規分子として,クローン#325を同定した.同因子は,未分化幹細胞や赤血球系細胞では発現が低いが,巨核球への分化に伴い発現が上昇することが明らかになった.
(2)巨核球を利用した小Maf群因子の構造・機能連関の解析.小Maf群因子は,ヒト,マウス,トリ,カエル,フグに至る多くの脊椎動物におて存在しており,bZip構造以外にも,そのアミノ末端側領域,カルボキシル末端側領域が良く保存されている.そこで,MafGのカルボキシル末端側の欠失変異分子を作製し,その性質を,in vitro, in transfecto,そして,トランスジェニックマウスを用いたin vivoの実験系で解析した.これまでにin tranfectoの結果として293T細胞に対する一過性遺伝子導入実験から,C末端欠失分子は,野生型分子に比べて,転写活性化をしやすい傾向があることが明らかになった.また,巨核球における過剰発現マウスでは,野生型分子も欠失分子も巨核球からの胞体突起形成を抑制したが,その抑制の程度は,欠失分子では軽度であることが示された.

Research Products

• [Publications] Yoh, K., Sugawara, T., Motohashi, H., Takahama, Y., et al.: "Transgenic over-expression of MafK suppresses T cell proliferation and function in vivo"Genes Cells. 6. 1055-1066 (2001)
• [Publications] Kusunoki H, Motohashi H, Katsuoka F, et al.: "Solution structure of the DNA-binding domain of MafG"Nature Struct. Biol.. 4. 252-256 (2002)
• [Publications] Kwak MK, Wakabayashi N, Itoh K, Motohashi H, et al.: "Modulation of gene expression by cancer chemopreventive dithiolethiones througth the Keap1-Nrf2 pathway : Identification of novel gene clusters for cell survival"J Biol Chem.. 278. 8135-8145 (2003)
• [Publications] Katsuoka, F., Motohashi, H., Tamagawa, Y., Kure, S., et al.: "Small Maf compound mutants display CNS neuronal degeneration, aberrant transcription and Bach protein mislocalization coincident with myoclonus and abnormal startle response"Mol. Cell. Biol.. 23. 1163-1174 (2003)
• [Publications] Noda, S., Harada, N., Hida, A., Fujii-Kuriyama, Y., Motohashi, H., et al.: "Gene expression of detoxifying enzymes in AhR and Nrf2 compound null mutant mouse"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 303. 105-111 (2003)
• [Publications] Motohashi, H., O'Connor, T., Katsuoka, F., et al.: "Integration and diversity of the regulatory network composed of Maf and CNC families of transcription factors"Gene. 294. 1-12 (2002)
• [Publications] 玉川優奈, 本橋ほづみ, 山本雅之: "血小板減少と転写因子"血液フロンティア. 11. 567-574 (2001)
• [Publications] 本橋ほづみ, 山本雅之: "モデル動物を用いた定最発現調節の解析"組織培養工学. 27. 259-262 (2001)