遺伝子発現プロファイリングによる腎細胞癌の病態診断に有用なマーカーの検索

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670184
• Research Institution: YOKOHAMA CITY UNIVERSITY SCHOOL OF MEDICINE
• Principal Investigator: 長嶋 洋治 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (10217995)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 矢尾 正祐 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (00260787)
• Keywords: 腎細胞癌 / マイクロアレイ / VHL遺伝子 / VEGF / HIF1α、2α / adipophilin / IGFBP-3

Research Abstract

(目的)腎細胞癌には臨床病理学的性質の異なる亜型があり、腫瘍の個性に基づいた戦略的治療が必要とされる。本研究ではマイクロアレイを用いて各亜型間での遺伝子発現プロファイリングの相違を検討し、腎細胞癌の病態診断に有用なマーカーを見出すことを目的とした。
(材料と方法)
1.1991年以降、横浜市立大学医学部附属病院において切除された腎細胞癌および非腫瘍部腎組織のうち、患者本人から遺伝子検索の承諾を得たものを対象とした。
2.腫瘍ならびに非腫瘍部からtotal RNAを抽出し、これを鋳型としてcDNAを合成、蛍光ラベルした。テストチップ(テスト2アレイ、Affimetrix社)で良質であることが確認されたものを、DNAチップ(HuGeneFLアレイ、Affimetrix社)上でハイブリダイズさせた。
3.腫瘍、正常組織試料間の蛍光強度差により遺伝子発現プロフィールの相違を検討した。
(結果)
1.淡明細胞腎癌においてadipophilin(細胞内脂質膜蛋白)、Insulin-like growth factor binding protein-3,vascular endothelial cell growth factor, hypoxia-Inducible factor1α、1βの発現レベルの上昇が認められた。免疫組織化学染色ではadipophilinが淡明細胞癌のいいマーカーであり、色素嫌性腎癌など他亜型との鑑別に有用であることを示した。
2.集合管癌については良好な核酸が得られなかったためマイクロアレイ解析は出来なかった。従来報告されている正常尿細管分節のマーカーを免疫組織化学的に検討したところ、集合管癌ではEMA, E-cadherinが高率に陽性像を示し、LeuM1,N-cadherinといった近位尿細管のマーカーは陰性を示した。特徴的な臨床、肉眼像と合わせて集合管癌の診断の補助となりうる。
3.並行して行っているvon Hippel-Lindau病遺伝子変異と腎細胞癌各種パラメータとの比較検討では、同遺伝子変異が腫瘍発生の初期におこっていること(Kondo, Yao, Nagashima et al.,2001)および散発例の淡明細胞腎癌では同遺伝子変異を有する症例は予後良好であること(Yao, Nagashima et al.,2002)を報告した。

Research Products

• [Publications] Kondo Ki, Yao M, Nagashima Y, et al.: "PTEN/MMAC1/TEP1 mutations in human primary renal-cell carcinomas and renal carcinoma cell lines"Int J Cancer. 91 2. 219-224 (2001)
• [Publications] Otani M, Nagashima Y et al.: "Intrarenal mature cystic teratoma associated with renal dysplasia : A case report with a review of literature"Pathol Int. 51 7. 560-563 (2001)
• [Publications] Otani M, Nagashima Y et al.: "Low-grade renal cell carcinoma arising from the lower nephron. A case report with immunohistochemical, histochemical and ultrastructural studies"Pathol Int. 51 12. 954-960 (2001)
• [Publications] Hamazaki S, Yao M, Nagashima Y, et al.: "Somatic von Hippel-Lindau gene mutation in a sporadic endolymphatic sac tumor"Hum Pathol. 32 11. 1272-1276 (2001)
• [Publications] Kato, Y, Nagashima Y, et al.: "Induction of SPARC by VEGF in human vascular endothelial cells"Biochem Biophys Res Comm. 287 2. 422-426 (2001)
• [Publications] Sakai N, Nagasima Y, Yao M et al.: "SPARC expression in primary human renal cell carcinoma : Upregulation of SPARC in sarcomatoid renal carcinoma"Hum Pathol. 32 10. 1064-1070 (2001)
• [Publications] 大谷方子, 長嶋洋治 他: "腎臓に発生した良性奇形腫の1症例"日本臨床細胞学会誌. 40 6. 644-645 (2001)
• [Publications] Horikawa S, Nagashima N et al.: "Prior induction of heme oxygenase-1 with glutathione depletor ameliorates the renal ischemia and reperfusion injury in the rat"FEBS Lett. 510 2. 221-224 (2002)
• [Publications] Kondo K, Yao M, Nagashima Y, et al.: "Comprehensive analysis of the VHL gene in sporadic renal cell carcinoma ; relationship to clinico-pathological parameter"Genes Chromosomes Cancer. 34 1. 58-68 (2002)
• [Publications] Yoneya R, Nagashima Y et al.: "Hemolysate pretreatment ameliorates the ischemic acute renal injury in rats"Nephron. 92 2. 407-413 (2002)
• [Publications] Murata H, Nagashima Y, Yao M et al.: "von Hippel-Lindau tumor suppressor protein transforms human neuroblastoma cells into functional neuron-like cells"Cancer Res. 62 23. 7004-7010 (2002)
• [Publications] Yoshida M, Yao M, Nagashima Y et al.: "Somatic VHL mutation in clear cell renal carcinomas associated with end-stage renal disease/acquired cystic disease of the kidney"Genes Chromosomes Cancer. 35 4. 359-364 (2002)
• [Publications] Yao M, Nagashima Y et al.: "VHL alterations associated with good prognosis in sporadic clear-cell renal carcinoma"J Natl Cancer Inst. 94 20. 1569-1575 (2002)
• [Publications] 長嶋洋治 他: "色素嫌性腎細胞癌の圧挫細胞診所見"日本臨床細胞学会誌. 41 6. 461-462 (2002)
• [Publications] 長嶋洋治, 稲山嘉明, 矢尾正祐: "vonHippel-Lindau病と腎腫瘍の病理"細胞. 35 1. 23-25 (2003)