2002 Fiscal Year Annual Research Report

樹状細胞を標的とする遺伝子ワクチン用ベクター開発

Research Project

Project/Area Number	13670242
Research Institution	CHIBA UNIVERSITY
Principal Investigator	青才文江千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80150316)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	野呂瀬一美千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (30156244) 矢野明彦千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (20135122)
Keywords	トキソプラズマ原虫 / 樹状細胞(DC) / ランゲルハンス細胞(LC) / 遺伝子発現ベクター / 遺伝子ワクチン / TgHSP70遺伝子 / 分子シャペロン
Research Abstract	我々はプロフェショナル抗原提示細胞である皮膚ランゲルハンス細胞(LC)・樹状細胞(DC)を標的としたトキソプラズマ分子シャペロンHSP70およびHSP30遺伝子によるワクチン開発を進めている。既に、トキソプラズマSAG1遺伝子導入皮膚片を用いた遺伝子ワクチン化皮膚移植により、Recipientにワクチン遺伝子産物に対する免疫応答反応を起こさせる方法を確立し、防御免疫が低応答性である(C57BL/6xBALB/c)F1マウスにBALB/cマウスの遺伝的高応答性を惹起させることに成功した(Vaccine,19:2172,2001)。しかしそのワクチン効果はなお充分ではなく、DCを標的としたワクチン開発の検討を行った。ただし、非分裂細胞に対する感受性からDCベクターとして機能が解析・報告され当初導入を予定していたLentivirusは国内ではavailableで無く、代替ウイルスベクターも考えたが安全性から最終的にバクテリアCpGモチーフを組み込んだプラスミドベクターの使用を検討し下記の結果を得た。組み込まれた非メチル化CpGモチーフを持つ合成オリゴデオキシヌクレオチドODN1466(TCAACGTTGA),ODN1555(GCTAGACGTTAGCGT)は既にinnate immunity誘導能が明らかにされている(PNAS,93:2879,1996;J.Immunol.,169:5590,2002)。用いたプラスミドベクターは強力なSV40プロモーターを有する真核細胞発現ベクターである。このプラスミドベクターを用いて、トキソプラズマ感染感受性C57BL/6マウスおよび抵抗性BALB/cマウスの腹部皮膚(上皮・真皮上部)のLC/DCに遺伝子銃によりトキソプラズマHSP70、HSP30およびSAG1遺伝子を直接遺伝子導入し、遺伝子導入LC/DCによる防御免疫誘導能を検討した。その結果、(1)T.g.HSP70遺伝子ワクチンにより、両マウス共HSP30/SAG1遺伝子に比べ、感染1週後の急性期および6週後の慢性期の臓器内トキソプラズマ数が著減し、最も著明なワクチン効果が誘導された。(2)皮膚LC/DCへの直接遺伝子導入により、筋肉および腹腔内注射に比べて極めて著しいワクチン効果が誘導され、本プラスミドベクターがLC/DCを標的とする遺伝子ワクチンに最適であることが判った。(3)プラスミドベクターを用いたT.g.HSP70遺伝子ワクチン効果は3ヶ月以上続いた。以上、本プラスミドベクターを用いてvirulent gene T.g.HSP70をTargetとした遺伝子ワクチン樹立に成功し、既に国際誌に報告済みである(Vaccine, 2003 in press)。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Mohamed, R.M. et al.: "Induction of protective immunity by DNA vaccination with Toxoplasma gondii HSP70, HSP30 and SAG1 genes"Vaccine. (In press). (2003)
[Publications] Chen, M. et al.: "The role of anti-HSP70 autoantibody-forming VH1-JH1 B-1 cells in Toxoplasma gondii-infected mice"Int. Immunol.. 15(1). 39-47 (2003)
[Publications] Chen, M. et al.: "Correlation between the avidity maturation of anti-HSP70 IgG autoantibody and recombination activating gene expressions in peripheral lymphoid tissues of Toxoplasma gondii-infected mice"Microbiol. Immunol.. 47(3). 217-221 (2003)
[Publications] Aosai, F. et al.: "Toxoplasma gondii-derived HSP70 functions as a B-cell mitogen"Cell Stress & Chaperones. 7(4). 357-364 (2002)
[Publications] Yano, A et al.: "Roles of IFN-γon stage conversion of an obligate intracellular protozoan parasite, Toxoplasma gondii"Intern. Rev. Immunol.. 21. 405-421 (2002)
[Publications] Luo, W.et al.: "Role of natural killer T cells in Graves' disease"Chin Med J (Engl).. 115(8). 1183-1185 (2002)
[Publications] Chen, M. et al.: "Involvement of MyD88 in host defense and the down-regulation of anti-HSP70 autoantibody formation by MyD88 in Toxoplasma gondii-infected mice"J. Parasitol.. 88(5). 1017-1019 (2002)
[Publications] Aosai, F. et al.: "Functional analysis of Toxoplasma gondii-derived HSP70 functions as a B cell mitogen"Proceedings of the 10^<th> International Congress of Parasitology-ICOPA X, Monduzzi Editore, Bologna, Italy. 6 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

樹状細胞を標的とする遺伝子ワクチン用ベクター開発

Principal Investigator

青才 文江 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80150316)

Research Products

[Publications] Mohamed, R.M. et al.: "Induction of protective immunity by DNA vaccination with Toxoplasma gondii HSP70, HSP30 and SAG1 genes"Vaccine. (In press). (2003)

[Publications] Chen, M. et al.: "The role of anti-HSP70 autoantibody-forming VH1-JH1 B-1 cells in Toxoplasma gondii-infected mice"Int. Immunol.. 15(1). 39-47 (2003)

[Publications] Chen, M. et al.: "Correlation between the avidity maturation of anti-HSP70 IgG autoantibody and recombination activating gene expressions in peripheral lymphoid tissues of Toxoplasma gondii-infected mice"Microbiol. Immunol.. 47(3). 217-221 (2003)

[Publications] Aosai, F. et al.: "Toxoplasma gondii-derived HSP70 functions as a B-cell mitogen"Cell Stress & Chaperones. 7(4). 357-364 (2002)

[Publications] Yano, A et al.: "Roles of IFN-γon stage conversion of an obligate intracellular protozoan parasite, Toxoplasma gondii"Intern. Rev. Immunol.. 21. 405-421 (2002)

[Publications] Luo, W.et al.: "Role of natural killer T cells in Graves' disease"Chin Med J (Engl).. 115(8). 1183-1185 (2002)

[Publications] Chen, M. et al.: "Involvement of MyD88 in host defense and the down-regulation of anti-HSP70 autoantibody formation by MyD88 in Toxoplasma gondii-infected mice"J. Parasitol.. 88(5). 1017-1019 (2002)

[Publications] Aosai, F. et al.: "Functional analysis of Toxoplasma gondii-derived HSP70 functions as a B cell mitogen"Proceedings of the 10^<th> International Congress of Parasitology-ICOPA X, Monduzzi Editore, Bologna, Italy. 6 (2002)

青才文江千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80150316)