弱毒化サルモネラを担体とした経口ワクチンによる細胞性免疫の誘導

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670288
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 松井 英則 北里大学, 北里生命科学研究所, 講師 (30219373)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 江口 正浩 北里大学, 北里生命科学研究所, 助手 (00312215) ; 中村 正彦 社団法人北里研究所, 基礎研究所, 研究員 (30155858) ; 一色 恭徳 城西大学, 薬学部, 助手 (60312211)
• Keywords: サルモネラ / ワクチン担体 / 免疫応答

Research Abstract

昨年度、Salmonella typhimuriumのストレス応答プロテアーゼの病原性に及ぼす役割を解明し、その欠損株がワクチン担体として利用できることを明らかにした。すなわち、S. typhimuriumのストレス応答プロテアーゼは種々の病原遺伝字の発現を調節しており、clpPX及びlon欠損変異株は経口感染マウスにごくわずかな量持続的に感染する。しかし病原性は極めて低くマウスの体重増加などに全く影響を及ぼさなかった。そこで本年度、clpPXあるいはlon欠損変異株をマウスへ経口接種し、持続的にマウスのサルモネラに対する免疫応答を解析した。どちらの株においても接種マウスの血清中のLPS特異的lgG量の増加は接種後4週から顕著となり24週でも高い価を持続していた。胆汁中のLPS特異的lgA量は1週から段階的に増加し、4週でピークとなり24週でも高い価を持続していた。そこで4週と24週で強毒株で攻撃したところ免疫していないマウスは感染後1週間以内に全て死亡したが、免疫マウスは全て生存した。次に攻撃後5日でパイエル板、腸間膜リンパ節、脾臓、盲腸での菌数を測定したが、興味深いことに免疫マウスでは全ての組織から強毒株もワクチン株も検出されなかった。ワクチン株の経口接種とその後の強毒株の攻撃により血中のLPS特異的なlgG1量の増加は認められなかったが、lgG2a量の増加が認められた。また同時に脾臓でIFN-γ遺伝子の発現量の増加とIL-4遺伝子の発現量の減少が認められた。以上の結果よりclpPX及びlon欠損変異株は1回の経口接種により防御抗原特異的な強力な体液性免疫と細胞性免疫が誘導できワクチンおよびワクチン担体としての応用が可能と考えられた。

Research Products

• [Publications] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Persistent increase in myofibroblasts in Helicobacter heilmannii-infected but not in Helicobacter pylori-infected Mongolian gerbil-colocalization of COXII and bFGF immunoreactivity"Aliment. Pharmacol. Ther. 16(suppl.2). 174-179 (2002)
• [Publications] T.Tomoyasu, H.Matsui, et al.: "The ClpPX ATP-dependent protease regulates flagellum synthesis in Salmonella enterica serovar Typhimurium"J. Bacteriol.. 18(3). 645-653 (2002)
• [Publications] A.Kaneko, H.Matsui, et al.: "Association of a regulatory gene, slyA with a mouse virulence of Salmonella serovar Choleraesuis"Microb. Immunol. 46(2). 109-113 (2002)
• [Publications] H.Tomoda, H.Matsui, et al.: "Purification of Shiga-like toxin 1 by pigeon egg white glycoproteins immobilized on Sepharose gels"Anal. Biochem. 311(1). 50-56 (2002)
• [Publications] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Interaction of leptin with gastric myobroblast transdifferentiation in Hp-infected Mongolian gerbil fundic mucosa"Ulcer Research. 29(2). 152-154 (2002)
• [Publications] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Autonomic innervation of Esophgeal cardial gland -Relation to effector sites of lansoprazole-"Prog. Med.. 282(3). 753-756 (2002)
• [Publications] A.Takaya, H.Matsui, et al.: "Lon, a stress-induced ATP-dependent protease is critically important for the systemic Salmonella infection in mice"Infect. Immun.. 71(2). 690-696 (2002)
• [Publications] H.Matsui, et al.: "Oral immunization with ATP-dependent protease-deficient mutants protects mice against subsequent challenge with virulent Salmonella enterica serovar Typhimurium"Infect. Immun.. 71(1). 30-39 (2002)
• [Publications] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Autoradiographic and confocal laser microcsopic observation show lafutidine binds to CGRP-immunoreactive nerves as well as gastric parietal cells"Inflammopharmacology. (in press). (2003)
• [Publications] Y.Akiba, M.Nakamura, et al.: "Acid-sensing pathways in rat gastrointestinal mucosa"J. Gastroenterol. 37(Suppl. XIV). 133-138 (2002)
• [Publications] 秋葉保忠, 中村正彦, 石井裕正: "NSAIDSによるラット十二指腸粘液分泌障害と粘膜傷害"Ulcer Res.. 29. 155-158 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "セロトニン作動薬の作用機序"日本医事新報. 4106. 147-148 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二, 石井裕正: "胃粘膜修復機転からみた線維芽細胞-筋線維芽細胞系の意義-"消化器科. 32(4). 355-359 (2001)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二, 秋葉保忠, 石井裕正: "胃粘膜における自律神経の意義-Helicobacter pylori感染と自律神経の関連-"自律神経. 38(2). 144-147 (2001)
• [Publications] M.Nakamura, K.Tsuchimoto, H.Ishii: "Alcohol and the pancreas"Alcoholism Clinical and Experimental Research. 25. 244S-250S (2001)
• [Publications] 中村正彦: "胃粘膜傷害と自律神経、血管新生因子、成長因子"日本医師会雑誌. 126. M28-M30 (2001)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二, 石井裕正: "H. pylori時代の消化性潰瘍学-H.pylori発見20周年を記念して-"日本臨床. 60(Suppl.2). 137-142 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "胃酸分泌と壁細胞-H2ブロッカーとPPIの対比-"消化器診療. 55. 12-13 (2002)
• [Publications] 中村正彦 et al.: "高齢ラットにおける胃、大腸固有筋層内glucagon受容体の分布"日本高年齢消化器医学会会誌. 4. 91-92 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二, 秋葉保忠: "実験潰瘍学会との出会い、その後"Ulcer Res. 29(Suppl.). 138-141 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "胃粘膜と微小循環-酸分泌との関連"消化器診療. 50. 10-11 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "胃壁在神経叢"消化器診療. 56. 10-11 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "胃粘膜防御機構"Annual. Review 消化器. 121-126 (2003)
• [Publications] Onoue, S., Imai, T., Kumada, H., Umemoto, T., Kaca, W., Isshiki, Y., Kaneko, A., Kawahara.K: "Serum antibodies of periodontitis patients compared to the lipopolysaccharides of Porphyromonas gingivalis and Fusobacterium nucleatum"Microbiol. Immunol. 47(1). 51-55 (2003)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二, 石井裕正: "消化管ホルモンの動態と酸分泌動態への影響"日本臨床. 60(Suppl.2). 137-142 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "胃酸分泌と壁細胞-H2ブロッカーとPPIの対比-"消化器診療. 55. 12-13 (2002)
• [Publications] 中村正彦, 土本寛二: "消化器内自律神経および壁在神経は再生するか-増殖因子特にbFGFとの関連-"医学のあゆみ. 201. 67-71 (2002)
• [Publications] 秋葉保志, 中村正彦: "消化管腔内酸感知機構におけるvanilloi受容体-cGMP-NOの役割"医学のあゆみ. 201. 59-65 (2002)
• [Publications] M.Eguchi, et al.: "Cytoprotection against ischemia-induced DNA cleavages and cell injuries in the rat liver by pro-vitsmine C via hydrolytic conversion into ascorbate"Mol. Cel. Biochem. (in press). (2003)
• [Publications] S.Ishikawa, H.Matsui, et al.: "Protection against Shiga toxin 1 challenge by immunization of mice with purified mutant Shiga toxin 1"Infect. Immun. 71(in press). (2003)
• [Publications] M.Nakamura, Y.Akiba, H.Matsui, H.Ishii: "Microcirculation Annual"Nihon-Igakukan. 2 (2002)
• [Publications] Y.Akiba, M.Nakamura, et al.: "Gastrointestinal function, regulation and Disturbances"Elsevier. 12 (2002)
• [Publications] 中村正彦: "塩基性線維芽細胞増殖因子. Technical Term消化管"先端医学社. 2 (2002)
• [Publications] Y.Akiba, M.Nakamura, H.Ishii: "Hyperemic response to luminal acid in rat lower intestine via vanilloid receptor-1"Nihon-Igakukan. 2 (2002)
• [Publications] 中村正彦: "カハール細胞.Technical Term消化管"先端医学社. 2 (2002)