パラインフルエンザ4型ウイルスの全遺伝子解析および受容体の解明

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670304
• Research Institution: Suzuka University of Medical Science
• Principal Investigator: 駒田 洋 鈴鹿医療科学大学, 保健衛生学部, 助教授 (10144247)
• Keywords: HPIV-4 / CD98HC / Tgマウス / mitogenesis / モノクローナル抗体

Research Abstract

1。パラインフルエンザ4A型ウイルス(HPIV-4A)のL蛋白貿の遺伝子、約7000bpのうち、約4500bpの決定を行った。
2。ヒトCD98HC(FRP-1)発現transgenicマウス(Tgマウス)を2匹作製した。これをもとに繁殖させ、サザンブロット法で陽性のものについて、臓器の凍結切片を作製し、ヒトCD98HCに対するモノクローナル抗体(mAb)(FITCラベル)を使用し直接蛍光抗体を行ったところ、胃、小腸、肺が陽性であった。TgマウスにおけるヒトCD98HCの役割は不明だった。
3。Tgマウスをさらに繁殖させ、16匹を得た。このマウスからフェノール法でDNAを精製し、PCR法でヒトCD98HCを検出したところ10匹が陽性だった。これらのマウスをかけ合わせ、ホモのマウスを作り、その後、パラインフルエンザ4型ウィルス感受性、組織分布の解析などを行う予定である。
4。マウスのCD98HCのmAb19個のうち9個について、培養土済からproteinGカラムで精製、濃縮した。これらmAbのマウス脾臓細胞(リンパ球)のconcanavalinAによるmitogenesisに対する作用を、BrdUの取り込みを測定することで解析した。9個のうち2個がmitogenesisを抑制した。また刺激リンパ球のCD98HCの発現をFlow cytometry法で調べたところ、刺激1時間ですでに発現の増加が認められ48時間で最大となった。これらのことからCD98HCがリンパ球増殖で必須の役割をしていることが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Nishio M. et al.: "High resistance of human parainfluenza type 2 virus protein-expressing cells to the antiviral and anti-cell proliferative activities of alpha/beta interferons : cysteine-rich V-specific domain is required for high resistance to the interferons"J Vivol.. 75(19). 9165-9176 (2001)
• [Publications] Tsurudome M. et al.: "Hemagglutinin-neuraminidase-independent fusion activity of simian virus 5 fusion (F) protein : difference in conformation between fusogenic and nonfusogenic F proteins on the cell surface"J Vivol.. 75(19). 8999-9009 (2001)
• [Publications] Kawano M. et al.: "Recovery of infectious human parainflueaza type 2 virus from cDNA clones and properties of the defective virus without V-specific cysteine-rich domain"Virology. 284(1). 99-112 (2001)