NKG2Dリガンドを介したInnate Immunityによる肺癌免疫治療の開発

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670588
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 西條 康夫 東北大学, 医学部附属病院, 助教授 (10270828)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 徳江 豊 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (80292275)
• Keywords: RAE-1 / NKG2D / gene therapy / immunotherapy

Research Abstract

NK細胞膜上に発現する受容体の中でNKG2Dは細胞内にITIMモチーフが欠損している活性型受容体である。ヒトおよびマウスのNKG2Dリガンドはそれぞれ、MICA・MICB(Science, 285:727,1999)とRAE-1・H60である(Immunity, 12:721,2000)。NK細胞はNKG2Dリガンドを認識し,殺細胞効果を発揮する。そこで、この系を使った免疫遺伝子治療の可能性を検討すべくマウスモデルで以下の実験を行った。前年度にクローニングしたRAE-1β cDNAをGFPcDNAと融合させ、レトロウイルスを用いた発現系を用いて検討したが、RAE-1-GFPの発現は極めて弱く、融合蛋白が効率的に発現していないことが強く示唆された。
そこで、GFPと融合させずにRAE-1βcDNAをアデノウイルス発現ベクターに組み込み、RAE-1発現アデノウイルス(AdRae-1)を作成し、ウイルスを大量に調整した。RAE-1に対するポリクローナル抗体が他施設で作成されたので、それを入手しAdRae-1ウイルス感染後癌細胞における細胞膜上におけるRAE-1発現をFACSで確認した。
次に、in vitroにおいてRAE-1発現癌細胞がNK細胞に対する感受性を得、NK細胞により傷害を受けることを確認した。また、ex vivoでAdRae-1を感染させたEL-4及びB16をマウスの皮下に移植したところ、EL-4は腫瘍の生着が完全に拒絶された。B16では腫瘍の増殖が37%抑えられた。腫瘍組織における免疫応答を免疫組織染色を用いて検討したところ、CD8T細胞とNK細胞を浸潤が強かった。中である。これらの実験結果は、NK細胞を中心とするInnate Immunityは腫瘍の拒絶や増殖抑制に関わることを示唆しており、腫瘍免疫治療の1つとなりうることを示している。

Research Products

• [Publications] Ishimoto O, Saijo Y, Narumi K, et al.: "High Level of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) in Pleural Effusion"Oncology. 63. 70-75 (2002)
• [Publications] Ohkouchi S, Yamada A, Saijo Y, et al.: "Non-mutated tumor-rejection antigen peptides elicit type-I allergy in the majority of healthy individuals"Tissue Antigens. 59. 259-272 (2002)
• [Publications] Saijo Y, Tanaka M, Miki M, et al.: "Proinflammatory Cytokine Interleukin-1β Promotes Tumor Growth of Lewis Lung Carcinoma by Induction of Angiogenic Factors"Journal of Immunology. 169. 469-475 (2002)
• [Publications] Inoue A, Saijo Y, Maemondo M, et al.: "Severe Acute Interstitial Pneumonia and Gefitinib"Lancet. 361. 137-139 (2003)