アシドーシスにより増悪する虚血性神経細胞障害の分子生物学的機構の解明

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670671
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 桂 研一郎 日本医科大学, 医学部, 講師 (50297892)
• Keywords: アシドーシス / FK506 / PKC / CaMKII

Research Abstract

完全脳虚血モデルを用いた、Protein kinase C(PKC), Calcium/calmodulin dependent protein kinase II(CaMKII)への増強したアシドーシスの及ぼす影響についてのこれまでの研究成果の上にたち、さらに研究を進めるために、脳保護作用が認められてきている免疫抑制薬FK506のPKC, CaMKII, P-tyrosineへの影響を砂ネズミの虚血再潅流モデルを用いて検討した。
【方法】雄砂ネズミの総頚動脈閉塞による前脳虚血及び再潅流モデル(5分間虚血)を用いた。虚血再潅流後1分にFK506を静脈内に投与し、再潅流後1時間、24時間にて液体窒素にて脳を凍らせ、保存した。海馬CAlセクターを切り出し保存した。サンプルのhomogenateを細胞質分画、膜分画に分けた後western blot法にてPKCγ、CaMKIIを測定し検討した。
【結果と考察】FK506投与群にてPKCγ,CaMKIIの細胞質より膜分画へのtranslocationの回復が促進しており、vehicle投与群では24時間再潅流時でも有意に上昇している結果がえられた。FK506投与はアシドーシス増強によるPKC, CaMKIIの動きと正反対の動きを示しており、PKCγとCaMKIIは再潅流24時間でtranslocationが遷延している場合細胞死につながることが強く示唆された。

Research Products

• [Publications] Katsura et al.: "Effects of FK506 on the translocation of protein kinase C and CaM kinaseII in the gerbil hippocampal CA1 neurons"Neurological Research. (in press). (2003)
• [Publications] Katsura et al.: "FK506 facilitates the normalization of post-ischemic perturbation of protein kinases and tyrosine phosphorylation in the gerbil hippocampal CAl sectors"International Congress Series. (in press). (2003)