2003 Fiscal Year Annual Research Report
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13670746
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
鈴木 英明 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (70196856)
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| Keywords | 転写因子 / ラミニン / プロモーター / クローニング / ハイブリットシステム / プラスミド / ルシフェラーゼ / クローニング |
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| Research Abstract |
ラミニンは、高血圧症、心筋症において心筋、血管細胞に病的に増加し、組織の硬化を招く一要因と考えられている。本教室では、ラミニンの転写機構を検討し転写を強く促進するbcn-1エレメントの存在見い出した(H.Suzuki, J. Biol. Chem.1996)。
今までに、イーストのワンハイブリッドシステムを用い、bcn-1に結合する転写因子SOL-1をクローニングし登録した(Genebank Acc. No. AF072836,H.Suzuki, et al.,1998)。
そこで、本年度は研究計画に従いSOL-1の機能を解明するために、遺伝子の調節発現に関与する分子間相互分子を明らかにすることを目的とした。
(A)分子間相互分子のクローニング:イーストのツーハイブリッドシステムを利用し、SOL-1をbaitに心筋由来cDNAライブラリーをスクリーニングした。
(B)cDNAクローンの評価:最終陽性クローンの全シークエンスを決定し、データーベースにて検討したところ、うちゲノムプロジェクトで明らかになった領域で一つのHypothetical Proteinをコードするものであり、SMARP(SOL-binding protein)と命名した。
SMARPの発現をノーザンで調べたところ、心筋と精巣に強く発現していることがわかった。
以上研究計画に従い、SOL転写因子に結合する分子間相互因子をクローニングすることを目的に、イーストのツーハイブリッドシステムを用いてcDNAライブラリーのスクリーニングを施行し、ラミニンB2鎖プロモーターの転写活性の調節に関与する因子をコードするクローンを得た。
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