2002 Fiscal Year Annual Research Report

KIT,FLT3を介する細胞増殖・生存・腫瘍化機構の解析

Research Project

Project/Area Number	13671063
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	倉恒弘彦大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50195533)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	水木満佐央大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80283761) 松村到大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00294083) 金倉譲大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20177489) 柴山浩彦大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60346202)
Keywords	receptor tyrosine kinase / mutation / acute myeloid leukemia / targeting therapy / chemotaxis / STAT
Research Abstract	1.Kitシグナル伝達に関与する細胞内ドメインチロシン残基の検討:野生型c-Kit細胞質内各Tyr残基のPhe置換にて細胞機能に及ぼす影響を検討した。増殖・生存は影響を受けなかったがTyr567,569,719置換は細胞遊走を阻害した。下流シグナルの解析の結果、Tyr567はsrc family kinase、p38MAP kinaseの活性化からCa2+influxを生じ、その下流でErk1/2の活性化を生じていた。一方Tyr719はP13-Kinaseの活性化を介してCa2+influxを生じていた。これらの2つのシグナルは協調的に働き細胞遊走をもたらすことを明らかにした。一方、c-Kitキナーゼ領域変異型では野生型と異なりTyr719のPhe置換で、キナーゼ活性を消失し増殖活性が阻害された。Tyr719が恒常的活性化に必須であると共に下流シグナルのPI3-Kinaseがの腫瘍性増殖に重要である事が見い出された。 2.活性化変異c-Kitレセプター特異的阻害療法の開発:STI571,AG1296などのチロシンキナーゼ阻害剤が野生型に比較して膜直下型変異c-Kit活性を強く抑制した。一方キナーゼ領域型には単独、併用にても全く無効で、変異の部位によって阻害剤の感受性が異なることを見い出した。 3.活性化変異Flt3特異的標的遺伝子の解析:Flt3の活性化変異Flt3-ITDを用いたmicrochip解析にてSTAT3/5の標的遺伝子である、pim-2,CIS,SOCS3の発現が特異的に認められSTAT3/5がFlt3-ITDの腫瘍原性シグナルであることが示唆された。一方Flt3-ITD特異的に抑制される遺伝子としては、C/EBPalpha, PU.1などの骨髄分化に必須の転写因子がありFlt3-ITDのAMLにおける分化の阻害への関与が示された。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 上田周二: "Critical roles of c-Kit tyrosine residues 567 and 719 in stem cell factor-induced chemotaxis : contribution of src family kinase and PI3-kinase on calcium mobilization and cell migration"Blood. 99. 3342-3349 (2002)
[Publications] 田中弘和: "E2F1 and c-Myc potentiate apoptosis through inhibition NF-κB that facilitates MnSOD-mediated ROS elimination"Molecular Cell. 9. 1017-1029 (2002)
[Publications] 園山順子: "Functional cooperation among Ras, STAT5, and PI3 is required for full oncogenic activities of BCR/ABL in K562 cells"J.Biol.Chem. 277. 8076-8082 (2002)
[Publications] 上田周二: "Constitutive activation of c-kit by the juxtamembrane but not the catalytic domain mutations is inhibited selectively by tyrosine kinase inhibitors STI571 and AG1296"Int.J.Hematol. 76. 427-435 (2002)
[Publications] 橋本光司: "Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the Asp814V mutation"Blood. 101. 1094-1102 (2003)
[Publications] 水木満佐央: "Suppression of myeloid transcription factors and induction of STAT response genes by AML-specific Flt3 mutations"Blood. (印刷中). (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

KIT,FLT3を介する細胞増殖・生存・腫瘍化機構の解析

Principal Investigator

倉恒 弘彦 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50195533)

Research Products

[Publications] 上田周二: "Critical roles of c-Kit tyrosine residues 567 and 719 in stem cell factor-induced chemotaxis : contribution of src family kinase and PI3-kinase on calcium mobilization and cell migration"Blood. 99. 3342-3349 (2002)

[Publications] 田中弘和: "E2F1 and c-Myc potentiate apoptosis through inhibition NF-κB that facilitates MnSOD-mediated ROS elimination"Molecular Cell. 9. 1017-1029 (2002)

[Publications] 園山順子: "Functional cooperation among Ras, STAT5, and PI3 is required for full oncogenic activities of BCR/ABL in K562 cells"J.Biol.Chem. 277. 8076-8082 (2002)

[Publications] 上田 周二: "Constitutive activation of c-kit by the juxtamembrane but not the catalytic domain mutations is inhibited selectively by tyrosine kinase inhibitors STI571 and AG1296"Int.J.Hematol. 76. 427-435 (2002)

[Publications] 橋本光司: "Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the Asp814V mutation"Blood. 101. 1094-1102 (2003)

[Publications] 水木満佐央: "Suppression of myeloid transcription factors and induction of STAT response genes by AML-specific Flt3 mutations"Blood. (印刷中). (2003)

倉恒弘彦大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50195533)

[Publications] 上田周二: "Constitutive activation of c-kit by the juxtamembrane but not the catalytic domain mutations is inhibited selectively by tyrosine kinase inhibitors STI571 and AG1296"Int.J.Hematol. 76. 427-435 (2002)