樹状細胞とその遊走因子を利用した新しい免疫遺伝子療法の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671220
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 高山 卓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (10332579)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 角田 卓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (30275359) ; 田原 秀晃 東京大学, 医科学研究所, 教授 (70322071)
• Keywords: 樹状細胞 / ケモカイン / SLC / in vivo electroporation / CCR7 / 腫瘍免疫 / Flt3L

Research Abstract

研究計画調書に記載した平成13年度の研究計画に沿って研究を進めた。
1.Th2型免疫反応を誘導し樹状細胞の遊走能に影響を与えるサイトカイン(IL-10)を樹状細胞の培養液に加えてその機序を解析した。その結果、ケモカインレセプターの一つであるCCR7の制御が樹状細胞の遊走を阻害し、免疫制御に深く関与することが判明した。(業績1)
2.CCR7のリガンドであるSLCが抗腫瘍免疫能を制御する可能性に注目し、その効果を検討するためにSLC遺伝子導入腫瘍細胞株を樹立することを試みた。SLCを遺伝子導入するためのレトロウイルスベクターを開発、次いでマウス可移植細胞株であるMCA205に感染させて、薬剤により感染陽性細胞株を選択し、SLCを強発現する細胞株を樹立した。この細胞をマウスに皮下移植し対照群とその腫瘍径を比較したところSLCを強発現する細胞株は有為な腫瘍の増殖抑制効果を示した。(未発表)
3.樹状細胞へのサイトカイン遺伝子導入により樹状細胞の機能改変のみならず個体の抗腫瘍効果の誘導を含めた免疫反応の制御が可能であることが判明した。(業績2)
4.樹状細胞は強力な抗原提示細胞であり、Flt3Lにより分化増殖が誘導される。そこで、、このFlt3Lをウイルスを用いない方法であるin vivo electroporation(IVE)法で遺伝子発現させ、生体内で樹状糸細胞を動員することを試みたところ、遺伝子導入後7日目では、脾臓および骨髄での樹状細胞数(CD11c^+細胞)は増加し、それらのうち成熟型を示す表面抗原(CD40^+/CD11c^+、CD80^+/CD11^+、CD86^+/CDllc^+)を持つものも増加した。この方法により生体内で樹状細胞を動員し免疫反応を制御できる可能性が示唆された。(第60回日本癌学会総会2001年9月にて発表)

Research Products

• [Publications] Takayama T, Morelli AE, Onai N, Hirao M, Matsushima K, Tahara H, Thomson AW: "Mammalian and viral IL-10 enhance C-C chemokine receptor 5 but down-regulate C-C chemokine receptor 7 expression by myeloid dendritic cells : impact on chemotactic responses and in vivo homing ability"Journal of Immunology. 166. 136-143 (2001)
• [Publications] Takayama T, Tahara H, Thomson AW: "Differential effects of myeloid dendritic cells retrovirally transduced to express mammlian or viral IL-10 CTL and NK cell activities and resistance to tumor growth"Transplantation 71:1334-40, 2001. 71. 1334-1340 (2001)