麻酔薬の各種悪性腫瘍細胞に対するアポトーシス誘導活性

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671609
• Research Institution: Meikai University
• Principal Investigator: 長坂 浩 明海大学, 歯学部, 教授 (10189110)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坂上 宏 明海大学, 歯学部, 教授 (50138484)
• Keywords: アポトシス / モルフィネ / コデイノン / コデイン

Research Abstract

コデイノンのアポトーシス誘導活性
[目的]:モルヒネ関連化合物は、がん性疼痛に臨床的に使われており、最近その代謝産物の一つであるモルヒネ6-グルクロナイドの消化器系がん細胞アポトーシス誘導が報告された。我々も、モルヒネ関連化合物12種類の構造活性相関を検討した結果、コデインの酸化生成物であるコデイノンにヒト前骨髄性白血病HL-60細包におけるヌクレオソーム単位のDNA断片化誘導活性を見出した(河瀬ら、Anticancer Res 22:in press, 2002)。今回、コデイノンのアポトーシス誘導活性について更に詳細に検討した。
[方法]:生細胞数はトリパンブルー染色により、DNAの断片化はDAPI法により、アポトーシス細胞の出現はアネキシン染色(FACS)により、プロカスパーゼの切断(活性化)及びミトコンドリアからのシトクロームcの放出はWestern blotにより、ミトコンドリアのMnSODの活性はNBT/リボフラビン活性染色により、MnSOD mRNAの発現はRT-PCRにより測定した。
[結果]:コデイノンは、濃度依存的に、細胞障害活性、アネキシン陽性細胞の出現、DNAの断片化、プロカスパーゼの切断、シトクロームcの放出を誘導した。この活性は、コデインやモルヒネ6-グルクロナイドよりも強かった。コデイノンの活性は、抗酸化剤のN-acetyl-L-cysteineにより(ミカエル付加反応により)強く抑制したが、MnSODの活性・発現には有意な影響を与えなかった。
[結論]コデイノンは、鎮痛作用も有することから、そのアポトーシス誘導活性と合わせて、末期がん患者への適用が期待される。その作用メカニズムについて更に検討中である。

Research Products

• [Publications] N.Hitosugi et al.: "Diverse biological activities of moxa and smoke"In Vivo. 15. 249-254 (2001)
• [Publications] N.Hitosugi et al.: "Induction of cell death by pro-oxidant action of Moxa"Anticancer Res. (2002)
• [Publications] 長坂 浩 et al.: "脊髄後角第5層型細胞の抑制性活動に及ぼすセボフルラン"麻酔. 51. 2-6 (2002)
• [Publications] H.Nagasaka et al.: "Allodynia-like phenomena associated with spinal A"The Internet Journal of Anesthesiology. 5. (2001)
• [Publications] Mizumoto, Nagasaka: "Halothane attenuates excitation and inhibitation of dorsal horn wide dynamic range neuronal"Journal of Saitama Medical School. (in press).
• [Publications] 長坂浩: "麻酔科診療プラクチス:まれな疾患の麻酔"文光堂. 2 (2001)