Galectin-3過剰発現による甲状腺発癌メカニズムの解明

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671777
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 猪原 秀典 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00273657)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 赤埴 詩朗 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80322189)
• Keywords: galectin-3 / 甲状腺癌 / サイログロブリンプロモーター / トランスジェニックマウス

Research Abstract

サイログロブリンプロモーター下にgalectin-3遺伝子をつないだ発現ベクターpSKTg-Gal-3を作製した。このベクターをgalectin-3を発現しない甲状腺正常濾胞細胞株TAD2にlipofectinを用いてtransienttransにtransfectionした。コントロールとしてSV40プロモーター下にgalectin-3遺伝子をつないだ発現ベクターpSG5-Gal-3もTAD-2にtransient transfectionした。Western blottingによりgalectin-3の発現をそれぞれのtransfectantで検討したところ、pSKTg-Gal-3のtransfectantではpSG5-Gal-3のtransfectantよりも程度は弱いがgalectin-3を発現していた。また、galectin-3だけでなくサイログロブリンも発現していない白血病細胞株Jurkatに同様にpSKTg-Gal-3をlipofectinを用いてtransient transfectionしたところgalectin-3の発現を認めなかったが、pSG5-Gal-3のtransient transfectantではgalectin-3の発現を認めた。以上より、pSKTg-Gal-3ではサイログロブリンプロモーター下にgalectin-3の発現を誘導できることが確認できた。即ち、pSKTg-Gal-3から切り出したトランスジーンを用いてトランスジェニックマウスを作製すると、甲状腺特異的にgalectin-3を発現し得ることが確認できた。続いて、このトランスジーンをマウス受精卵の前核中にマイクロマニピュレーターを用いて注入した。注入後に生き残った受精卵を不妊手術をした雄と交尾した仮親の卵管中に移植した。現在、出生した子供の尾から採血しDNAを抽出してPCRを行い、トランスジーンが組み込まれた子供を選別している段階である。