水チャネル蛋白質、アクアポリンの外分泌腺細胞における発現と機能調節の分子機構

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671940
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 細井 和雄 徳島大学, 歯学部, 教授 (10049413)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 多田 淳 徳島大学, 歯学部・附属病院, 医員 ; 赤松 徹也 徳島大学, 歯学部, 助手 (80294700) ; 金森 憲雄 徳島大学, 歯学部, 助教授 (90064865)
• Keywords: アクアポリン / 十二指腸 / VIP / トラフィッキング

Research Abstract

本研究では主として唾液腺をはじめとする外分泌腺において水輸送蛋白質、アクアポリン(AQP)の発現調節、機能調節を細胞生理学、分子生理学的に明らかにすることを目的とした。13年度までに、
1.ラット下部胃および十二指腸において外分泌腺型AQPであるAQP5が発現していることを初めて明らかにした。AQP5は下部胃においては基底側陰窩の上皮細胞に、また十二指腸においてはブルーナー腺に発現する事を見いだした。凍結切片の蛍光抗体による免疫組織化学染色ではいずれの場合もAQP5は主として腺腔側膜に局在した。より緩和な固定を行いABC法により観察するとブルーナー腺ではAQP5は一部細胞内の分泌顆粒膜に局在した。Vasointestinal polypeptiide(VIP)は分泌顆粒の内容物を放出し腺腔側を拡大した。同時に腺腔側膜には無刺激コントロールに比してAQP5の強い免疫反応が認められた。VIP処理前後のラット十二指腸より腺腔側膜を調製し、ウェッスタンブロットを行うとVIPにより腺腔側膜におけるAQP5の明らかな増加(50%)を認めた。VIPは十二指腸ブルーナー腺におけるAQP5のトラフィッキングを惹起させると考えられた。
2.正常SDラット唾液腺(顎下腺)のAQP5発現レベルを調べた所、高発現ラットおよび低発現ラットが存在する事を見いだした。発現レベルの差は耳下腺においても認められたので遺伝的変化と考えられる。2種のラットを近交化する目的で兄妹交配を進め現在5代目に到った。5代目ラットでは発現レベルの差は100倍以上に達した。近交系を確立し、それらの生理学的パラメーターを調べ、もってAQP5の生理機能を究明する。

Research Products

• [Publications] Kanamori, N. et al.: "Search for the Dye that Stains the Vascular System"ITE LETTERS on Batteries, New Technologies & Medicine(with News). 2(1). 116-119 (2001)
• [Publications] Wei, W.et al.: "Induction of C-reactive protein, serum amyloid P component, and kininogens in the submandibular and lacrimal glands of rats with experimentally induced inflammation"Life Sciences. 69(3). 359-368 (2001)
• [Publications] Kurabuchi, S et al.: "Androgen regulation of the cellular distribution of the true tissue kallikrein mK1 in the submandibular gland of the mouse"Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 49(6). 801-802 (2001)
• [Publications] Parvin, M.N. et al.: "Structure, function, and transcriptional regulation of aquaporins, proteins of the water channel family"Dentistry in Japan. 37. 26-31 (2001)
• [Publications] 倉淵真吾 他: "マウス顎下腺顆粒性導管の性差とホルモンによる調節 -免疫組織化学的解析-"日本咀嚼学会雑誌. 10(2). 61-70 (2001)
• [Publications] Parvin, M.N., et al.: "Expression and localization of AQP4 in the crypt epithelial cells of the rat duodenum"Biomedical Research. 12(2). 77-82 (2001)
• [Publications] Parvin, M.N., et al.: "Expression and hormone-induced redistribution of AQP5 in Brunner's gland of the rat duodenum"Biochimica et Biophysica Acta : Melecular Cell Researcgh. 1542(1-3). 116-124 (2002)
• [Publications] Kurabuchi, S. et al.: "Developmental and androgenic regulation of the immunocytochemical distribution of mK1, a true tissue kallikrein, in the granular convoluted tubule of the mouse submandibular gland"Jaurnal of Histochemistry and Cytochemistry. (in press). (2002)
• [Publications] 細井和雄(分担執筆)他: "分子細胞生物学基礎実験法 改訂第2版"南江堂(印刷中).