2002 Fiscal Year Annual Research Report
口腔扁平上皮癌におけるEpstein-Barr Virusの感染レセプターの解明
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13671970
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
大部 一成 九州大学, 歯学研究院, 助手 (80243955)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
立石 康一郎 九州大学, 歯学部附属病院, 助手 (80294958)
利谷 幸治 九州大学, 歯学研究院, 助手 (60284519)
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| Keywords | Epstein-Barr virus / 感染レセプター / 口腔扁平上皮癌 / CD21 |
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| Research Abstract |
口腔扁平上皮癌におけるEBウイルス感染レセプター解明のため本研究に必要なバーキットリンパ腫由来のEBウイルス感染Akata細胞を北海道大学医学部癌研ウイルス部門より入手し、CD21cDNAを米国アラバマ大学より入手した。
口腔扁平上皮癌における、EBウイルス感染実験の陽性コントロールの作製のため、CD21(Bリンパ球細胞におけるEBウイルス感染レセプター)未発現口腔扁平上皮癌由来細胞株SASに、CD21cDNAとネオマイシン耐性遺伝子を含むレトロウイルスベクターに組み込んだpLNCX-CR2、1μgをリポフェクション法にて遺伝子導入した。ネオマイシンで約2週間選択し、CD21の細胞表面発現は抗CD21抗体OKB7を用いて、フローサイトメトリーでスクリーニングし、CD21発現細胞SAS-CD21-2細胞を単難した。このCD21発現細胞とオリジナルSAS細胞とを細胞生物学的に比較したところ、細胞の大きさはやや小さかったが、形態や増殖能に大きな違いは認めなかった。SAS-CD21-2細胞とAkata細胞との共培養でEBウイルス感染実験を行った結果、10代継代後もEBウイルスの潜伏感染を、in situ hybridization法を用いて検出、感染を認めた(第47回日本口腔外科学会総会(平成14年11月1日、札幌市)において発表)。
一方、CD21未発現SAS細胞ではAkata細胞との共培養でEBウイルス感染は認めたが、3代継代後に細胞死を起こし、EBウイルスの溶解感染が疑われた。
現在CD21発現細胞でのBウイルス遺伝子の発現状況を検索し、CD21の発現と潜伏感染の関係を解明中である。またCD21未発現細胞での感染経路についても検索中である。
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