2002 Fiscal Year Annual Research Report
P.gingivalisの細胞分裂関連因子を応用した歯周病リスク診断法の開発
Project/Area Number |
13672164
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Research Institution | Kyushu Dental College |
Principal Investigator |
安細 敏弘 九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (80244789)
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Keywords | FtsZ / 歯周病 / P. gingivalis / 細胞分裂 |
Research Abstract |
我々はこれまでにPorphyromonas gingivalis(以下P. g)のペプチドグリカン合成過程に重要な酵素の一つであるmurC遺伝子の構造と機能を明らかにした。この領域は大腸菌におけるmra領域(murein synthesis cluster a)に相当しており、murC遺伝子の下流に3つのORFが存在し、それぞれが大腸菌のFtsQ、FtsAおよびFtsZに対して高いホモロジー(16%,33%,54%)を示すことがわかった。P. gFtsZは、他菌種FtsZと同様にGTPase活性を有するが、以下の点でユニークな性質を示すことがわかった。すなわち、1)GTPase活性がNa^+やK^+によって活性が阻害されること、2)Mg^<2+>非存在下でも活性を有すること、およびEDTAによって活性が阻害されないことが明らかとなった。また、P. gFtsZのC末端deletion mutantを作製して、大腸菌におけるfi1amentotionの変化を観察したところ、C末端から177アミノ酸をdeletionしたmutontでは、filamentationがみられなくなることからT281からR329の49アミノ酸残基内にP. gFtsZの機能に重要な領域が存在することが示唆された。そこで細菌由来のFtsZについてアラインメント分析を行ったところ,A320を中心とした10残基からなる保存領域が存在することを見いだし,A-domainと名付けた。site-directed mutagenesis法により作製されたAlo320をターゲットにした2つの点変異株(A320HおよびA320R)では,P. gFtsZタンパクの発現によってfilamentationが観寮されず,コントロールと同様の形態を示した。またA-domainのG322の点変異株においても同様の結果であった。これらの結果からP. gFtsZのA1a320とGly322が細胞分裂に重要な役割を有していることが示唆された.A-domainは他の歯周病原因菌においても存在していることから、A-domainを含むプライマーを用いることにより、歯周病のリスク診断が可能であることが示唆された。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Akifusa, S., Ansai, T.et al.: "Characterization of the Porphyromonas gingivalis FtsZ containing a novel GTPase activity"Curr. Microbiol.. 44. 267-272 (2002)
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[Publications] Arimoto, T., Ansaai, T., et al.: "kinetic analysis of PPi-dependent phosphofructokinase from Porphyromonas gingivalis"FEMS Microbiol.Lett.. 207. 35-38 (2002)
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[Publications] Yu, W., Ansai, T.et al.: "A conserved Ala320 in the FtsZ of Porphyromonas gingivalis is important for cell division"Curr. Microbiol.. 45. 355-361 (2002)
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[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and expression of a Porphyromonas gingivalis gene for protoporphyrinogen oxidase by complementation of a hemG mutant of Escherichia coli"Oral Microbiol. Immunol.. 17. 290-295 (2002)
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[Publications] Ansai, T., et al.: "Conserved proline residues near the N-terminus are important for enzymatic activity of class A bacterial acid phosphatases"Arch. Biochem. Biophysic.. 408. 144-146 (2002)
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[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and sequencing of a hemK-family gene in Porphyromonas gingivalis"DNA seq.. (in press).
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[Publications] 安細 敏宏(分担執筆): "歯周病最前線-オーラルケアが守る長寿社会のQOL-"日本歯科評論. 354 (2000)