2002 Fiscal Year Annual Research Report

脳微小血管のアクアポリンサブタイプの同定と発現調節:その病態生理学的意義

Research Project

Project/Area Number	13672394
Research Institution	宮崎医科大学
Principal Investigator	小林英幸宮崎医科大学, 医学部, 助教授 (40148953)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	横尾宏毅宮崎医科大学, 医学部, 助手 (30332894) 柳田俊彦宮崎医科大学, 医学部, 助手 (60295227) 和田明彦宮崎医科大学, 医学部, 教授 (30131949) 上園保仁長崎大学, 医学部, 講師 (20213340)
Keywords	脳微小血管 / アクアポリン / 培養内皮細胞 / 虚血・低酸素 / アストロサイト / 発現調節 / 細胞障害性浮腫 / 不死化細胞
Research Abstract	脳微小血管のアクアポリン(AQP)サブタイプの発現調節機構を解析し、その病態生理学的意義を明らかにすることを目的とした。微小血管は、ラット大脳皮質から高濃度アルブミン溶液を使用した浮遊遠心分離とグラスビーズろ過法を用いて調製した。AQPサブタイプ1-5のmRNAは、逆転写-ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)で解析した。AQP1mRNAの発現量は少なく、ポジティブコントロールとして用いた腎での発現の1/100以下であった。AQP4mRNAは、腎と同程度発現していた。脳微小血管のAQP1蛋白は28kDaで、その発現量は腎の1/10以下であった。腎で40kDaのバンドとして検出された糖付加型は発現していなかった。AQP4蛋白は、30kDaのバンドとオリゴマーと考えられる高分子量のバンドと、さらに分子量の高い不溶性のバンドとして検出された。免疫組織化学染色ではAQP1シグナルは非常に弱かったが、AQP4は、微小血管内皮細胞の細胞膜に局在していた。初代培養脳微小血管内皮細胞に培養アストロサイトの培養液を添加し培養するとAQP1mRNAレベルは20%減少した。また、SV40で不死化したラット脳微小血管内皮細胞GP8では、アストロサイト培養液で70%減少した。一方、GP8を1% 02の低酸素下で培養すると、AQP1mRNAは18時間後に2.5倍に増加した。 AQP1は、アストロサイト由来因子により発現が抑制されていること、また低酸素により発現が増加することよりAQP1は細胞障害性浮腫を生じる原因分子である可能性が示唆された。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] H.Koabayshi: "Aquaporin subtypes in rat cerebral microvessels"Neuroscience Letters. 297. 163-166 (2001)
[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin in the cerebral circulation"Peptides. 22. 1825-1834 (2001)
[Publications] S.Minami: "Selective expression of aquaporin 1, 4 and 5 in the rat middle ear"Hearing Research. 158. 51-56 (2001)
[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin regulates blood-brain barrier function in vitro"Neuroreport. 12. 4139-4142 (2001)
[Publications] B.Kis: "Cerebral endothelial cells are a major source of adrenomedullin"Journal of Neuroendocrinology. 14. 283-293 (2002)
[Publications] 小林英幸: "脳微小血管の機能調節"日薬理誌. 119. 281-286 (2002)
[Publications] 小林英幸: "脳微小血管の機能調節:神経支配と生理活性ペプチド"血管. 25. 155-164 (2002)
[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin, an autocrine mediator of the blood-brain barrier function"Hypertension Research. 26. s61-s70 (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

脳微小血管のアクアポリンサブタイプの同定と発現調節:その病態生理学的意義

Principal Investigator

小林 英幸 宮崎医科大学, 医学部, 助教授 (40148953)

Research Products

[Publications] H.Koabayshi: "Aquaporin subtypes in rat cerebral microvessels"Neuroscience Letters. 297. 163-166 (2001)

[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin in the cerebral circulation"Peptides. 22. 1825-1834 (2001)

[Publications] S.Minami: "Selective expression of aquaporin 1, 4 and 5 in the rat middle ear"Hearing Research. 158. 51-56 (2001)

[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin regulates blood-brain barrier function in vitro"Neuroreport. 12. 4139-4142 (2001)

[Publications] B.Kis: "Cerebral endothelial cells are a major source of adrenomedullin"Journal of Neuroendocrinology. 14. 283-293 (2002)

[Publications] 小林英幸: "脳微小血管の機能調節"日薬理誌. 119. 281-286 (2002)

[Publications] 小林英幸: "脳微小血管の機能調節:神経支配と生理活性ペプチド"血管. 25. 155-164 (2002)

[Publications] B.Kis: "Adrenomedullin, an autocrine mediator of the blood-brain barrier function"Hypertension Research. 26. s61-s70 (2003)

小林英幸宮崎医科大学, 医学部, 助教授 (40148953)